1.經(jīng)典的生化鑒定方法系通過(guò)47項生化學(xué)試驗鑒定到屬和種,再用因子血清分型,手續繁瑣。
2.實(shí)驗室的常規方法一般只通過(guò)三糖鐵瓊脂或其他類(lèi)似方法篩選菌株后,用多價(jià)和單價(jià)因子血清作玻片凝集試驗分型。這種方法實(shí)際上并未將培養物鑒定到屬和種,篩選出來(lái)的培養物包含了幾個(gè)屬、種的可能性。
3.使用微量生化板和微量生化管,在操作上比經(jīng)典生化試驗簡(jiǎn)單得多。但由于微量生化板和微量生化管的生產(chǎn)技術(shù)問(wèn)題,有些極重要的生化項目未被采用,如KCN試驗是無(wú)法制成反應紙片和微量管;有些生化反應紙片和微量管制成后容易失效,常不能使全部陽(yáng)性反應都如實(shí)顯示出來(lái)。一般來(lái)說(shuō),采用微量生化試驗鑒定菌種,比單用三糖鐵瓊脂要好得多,一般可以鑒定到屬和種,結果比較準確,但誤診的情況仍有發(fā)生。
4.微生物自動(dòng)分析儀則有比較多的問(wèn)題,也是因為它不能將某些重要的試驗列入其中,如氰化鉀、克氏pH7.2尿素酶試驗等。
5.熒光抗體技術(shù)可檢測出標本中病原細菌的存在。其原理是用已知的抗體血清,與標本中的細菌抗原相結合,采用熒光技術(shù)使結果顯示出來(lái)。由于熒光抗體技術(shù)是抗原抗體反應,所以不能代替病原細菌的分離培養。
隨著(zhù)DNA分子雜交技術(shù)在細菌分類(lèi)學(xué)領(lǐng)域中的應用,派生出用于細菌屬、種鑒定的DNA探針技術(shù)和聚合酶鏈反應(PCR)技術(shù)。
6.DNA探針是篩選出來(lái)的DNA片段,可以特異性地與標本中特定病原菌DNA相結合,從而測知標本中特定病原菌的存在。但DNA探針技術(shù)還不夠成熟,尚在研究中。
7.PCR技術(shù)是人工擴增已知DNA片段的技術(shù),可使目的基因迅速擴增百萬(wàn)倍,靈敏度極高。
盡管如此,DNA探針技術(shù)和PCR技術(shù)由于對特定的技術(shù)要求很高,在一般實(shí)驗室常易使探針和引物污染而導致假陽(yáng)性反應,故尚不適宜用作常規試驗方法。
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