海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
方法和取樣量
定量檢驗是應用“三管”增菌法，檢驗和定量樣品中極少量的阪崎腸桿菌（克羅諾桿菌屬）。檢驗需 要333 g樣品。
樣品制備
取樣前消毒樣品包裝的開(kāi)啟處和取樣勺。無(wú)菌稱(chēng)取樣品100 g,10 g和1 g各三份分別加人2 L, 250 mL和125 mL的樣品稀釋瓶中，加入9倍預熱到45℃的滅菌蒸餾水（1 ： 10稀釋?zhuān)�，或者將樣品�?接稱(chēng)量到裝有9倍預熱到45℃的滅菌蒸餾水的樣品稀釋瓶中，振搖使樣品充分混勻，36℃±1℃培養18h~22h。
選擇性增菌
分別移取培養18h~22h的懸液各1.0 mL加人9.0 mL克羅諾桿菌肉湯中，36℃ ± 1 °C培養 24 h±2 h，取1.0 mL滅菌生理鹽水，加人9.0 mL克羅諾桿菌肉湯中作為空白對照。
初篩結果觀(guān)察
將培養后的試管置于366 nm波長(cháng)的UV燈下觀(guān)察是否產(chǎn)生熒光，以空白樣品作為對照。如果無(wú) 熒光產(chǎn)生，阪崎腸桿菌（克羅諾桿菌屬）為陰性；如果產(chǎn)生熒光，則以下列步驟進(jìn)行操作。
可疑菌分離
輕輕混勻增菌液，每份增菌液用3 mm接種環(huán)（10μL）分別接種2個(gè)克羅諾桿菌顯色平板，三區法 或四區法劃線(xiàn)，以得到單個(gè)菌落。將平板置36 ℃±1 ℃培養18 h〜22 h。
結果判別
觀(guān)察平板上阪崎腸桿菌（克羅諾桿菌屬）的典型形態(tài)。在克羅諾桿菌顯色平板上為藍綠色菌落，圓 形，直徑1 mm〜2 mm。
可疑菌產(chǎn)黃色素試驗
從顯色平板上挑取1〜5個(gè)可疑菌落分別接種到TSA平板上，25℃±1℃培養48 h〜72 h。
可疑菌生化鑒定實(shí)驗
從TSA平板上挑取黃色菌落，革蘭氏染色，做氧化酶試驗。革蘭氏染色陰性，氧化酶試驗陰性，應 用生化鑒定試劑或其他細菌鑒定系統進(jìn)行鑒定。
上一篇：mLST-Vm與DFI培養基原理
