用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1.0 mL,沿管壁緩慢注于裝有9mL0.85%生理鹽水的無(wú)菌試管中(注意吸管尖端不要觸及稀釋液),振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。
另取1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸頭,按上述操作順序,做10倍遞增樣品勻液,如此每遞增稀釋一次,即換用1次1mL滅菌吸管或吸頭。
根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計,選擇三個(gè)連續的適宜稀釋度,每個(gè)稀釋度吸取0.1 mL稀釋液于BBL瓊脂平板進(jìn)行表面涂布, 每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。絕對厭氧,36±1℃ 培養48±2 h,培養后選取菌落數在30~300之間的平板進(jìn)行計數。