白色念珠菌培養與檢測

1、增菌培養   取供試液10ml（相當于供試品1g、ml、10cm2）直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉湯培養基中，培養48～72小時(shí)。

2、分離培養    取上述培養物劃線(xiàn)接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上，培養24～48小時(shí)（必要時(shí)延長(cháng)至72小時(shí)）。

結果判斷

白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養基上生長(cháng)的菌落呈乳白色偶見(jiàn)淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，培養時(shí)間稍久則菌落增大，顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺摺。若平板上無(wú)菌落生長(cháng)或生長(cháng)的菌落與上述菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出白色念珠菌。

如平板上生長(cháng)的菌落與上述菌落形態(tài)特征相符或疑似，應挑選2～3個(gè)菌落分別接種至念珠菌顯色培養基平板上，培養24～48小時(shí)（必要時(shí)延長(cháng)至72小時(shí)）。若平板上無(wú)綠色或翠綠色的菌落生長(cháng)，判供試品未檢出白色念珠菌。

若平板上生長(cháng)的菌落為綠色或翠綠色，挑取相符或疑似的菌落接種于1%吐溫80玉米瓊脂培養基上，培養24～48小時(shí)。取培養物進(jìn)行染色，鏡檢及芽管試驗。

芽管試驗　挑取1%吐溫80玉米瓊脂培養基上的培養物，接種于加有一滴血清的載玻片上，蓋上蓋玻片，置濕潤的平皿內，置35～37℃、1～3h，置顯微鏡下觀(guān)察，可見(jiàn)到由孢子長(cháng)出短小芽管。

若上述疑似菌為非革蘭陽(yáng)性菌，顯微鏡未見(jiàn)厚膜孢子、假菌絲、芽管，判供試品未檢出白色念珠菌。

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