MMA平板
30℃48h,在45度的光照射下為藍色或者蘭灰色,扁平圓潤,稍有凸起,邊緣整齊, 菌落較小,約為0.5mm左右。 盡管抑制性強,但與雜菌無(wú)法區別。
(無(wú)選擇性,無(wú)鑒別性)
OXA平板
單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117
24-48h,35℃培養
菌落呈黑色,直徑1mm,在其周?chē)纬梢粋(gè)黑色環(huán)。
分離原理主要是基于李斯特氏菌具有β-D-葡萄糖苷酶的活性,能水解培養基中的七葉靈,產(chǎn)生七葉苷,與鐵離子產(chǎn)生顏色反應而,使菌落為棕褐色,并帶有褐色暈圈,而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能發(fā)生這種反應(有選擇性,無(wú)鑒別性)
PALCAM
Lm在PALCAM培養基生長(cháng)特征: 37℃24h-48h,2mm灰綠色中心凹陷,菌落周?chē)首睾谏馊。由于含七葉苷及檸檬酸鐵銨,中心有時(shí)為黑色。PALCAM由于加入氯化鋰及三種抑菌劑,其抑菌能力大于CHROMagar。氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長(cháng),抑菌劑抑制除李斯特氏菌外的革蘭氏陽(yáng)性菌生長(cháng)。(強選擇性,無(wú)鑒別性)
CHROMagar顯色培養基上的菌落形態(tài)
單增李斯特氏菌37℃培養18-24小時(shí),平板上出現藍色菌落,菌落周?chē)幸徊煌该鳝h(huán)。伊氏(綿羊)李斯特氏菌37℃培養48小時(shí),平板上出現藍色菌落,菌落周?chē)幸徊煌该鳝h(huán)。西爾李斯特氏菌37℃培養24-48小時(shí),平板上出現藍色菌落,菌落周?chē)鷽](méi)有不透明環(huán)。在食品中綿羊李斯特氏菌非常少見(jiàn)。(*細小針尖狀菌落)
原理
單增李斯特氏菌顯藍色(指示劑),菌落周?chē)幸徊煌该鳝h(huán)(酶的作用),其原理主要是此酶由毒力基因編碼的溶血素產(chǎn)生,而此種溶血素只存在于單核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中,因而可以很好的將此兩種菌同李斯特氏屬的其他種分開(kāi)。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長(cháng),抑菌劑抑制除李斯特氏菌外的革蘭氏陽(yáng)性菌生長(cháng)。 (有選擇性,有鑒別性)
幾種分離顯色培養基的比較結論
進(jìn)口PALCAM和科瑪嘉均優(yōu)于進(jìn)口OXA、國產(chǎn)PALCAM、國產(chǎn)OXA和MMA。背景微生物較少時(shí),科瑪嘉的分離效果最好;背景微生物較復雜時(shí),進(jìn)口PALCAM分離效果最好。
MMA抑制性強,菌落小、形態(tài)不典型,很難與雜菌區分。進(jìn)口PALCAM 、進(jìn)口OXA菌落較典型,易與雜菌區分。CHROMagar菌落較典型,易與雜菌區分,對高污染食品中的雜菌抑制性較差。
根據長(cháng)期使用經(jīng)驗及實(shí)驗結果結合參考文獻,修訂標準擬采用PALCAM和CHROMagar分離培養基。
回收率: 進(jìn)口PALCAM和CHROMagar較高,結果穩定
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