USDA-FSIS檢測單增李斯特菌

增菌培養

第一步增菌培養：用UVM肉湯，30±2℃培養22±2h

第二步增菌培養：用Fraser肉湯，從UVM增菌肉湯中取0.1±0.02ml培養液加入10±0.5ml Fraser肉湯中， 35±2℃

 培養24-48小時(shí)。

選擇性分離培養

   取0.1ml 30±2℃培養22±2h UVM肉湯培養物，劃線(xiàn)接種到MOX平板上， 35±2℃培養24-48小時(shí)，檢查有無(wú)黑色菌落，并菌落外圍有黑色環(huán)。 Fraser肉湯培養26±2小時(shí)，出現明顯黑色，取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35±2℃至少培養24小時(shí)，若Fraser肉湯培養26±2小時(shí)，沒(méi)有出現明顯黑色，繼續培養至48±2小時(shí)，出現明顯黑色，取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35±2℃至少培養24小時(shí)。若培養48小時(shí)，仍沒(méi)有出現明顯黑色，并在XOA上沒(méi)有可疑菌落，則此樣品為單增李斯特氏菌陰性。

 從XOA平板上挑取至少20個(gè)可疑菌落，接種到HL瓊脂平板上， 35±2℃培養18-26小時(shí)，在暗光線(xiàn)下檢查是否有小的β溶血環(huán)。如果有，挑取單菌落進(jìn)行確證試驗。如果沒(méi)有，此樣品為單增李斯特氏菌陰性。

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