前增菌培養和增菌培養
在BLEB 增菌液中30℃培養4h后,加入選擇性試劑,繼續30℃培養48h.若沒(méi)有放線(xiàn)菌酮,也可用25mg/L的匹馬菌素代替,且比放線(xiàn)菌酮更安全.巴氏消毒乳、乳制品、酸乳酪、冷凍水產(chǎn)品等,含有較少的酵母菌和較少霉菌,因此不需加入抗菌劑.但生乳、干的海產(chǎn)品或新鮮產(chǎn)品則需加入抗菌劑.
在增菌培養中,所使用的培養基為緩沖李斯特氏菌增菌液(BLEB)。是否能檢測出單增李斯特氏菌,培養基的質(zhì)量至關(guān)重要。好的增菌液接種10個(gè)單增李斯特氏菌,通過(guò)增菌培養24-48小時(shí),可增菌到1-10億個(gè)菌/ml;不好的增菌液僅能增菌到1萬(wàn)個(gè)菌/ml,若有雜菌干擾便不能分離出目標菌。本公司對比了不同廠(chǎng)家的李氏菌增菌液,足可說(shuō)明此問(wèn)題。通過(guò)下表說(shuō)明,我公司的EB增菌液可增菌到10-8,國內廠(chǎng)家僅增菌到10-4、10-5,國外增菌到10-8。AOAC實(shí)驗表明,增菌液菌濃度10000cfu/ml,平板培養大約100cfu/ml.因此,若增菌液中菌濃度太低,試驗結果可能會(huì )給出錯誤的陰性結果.
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