每份樣品接種4管酸性肉湯和2管麥芽浸膏湯。每管接種1 mL(g)~2 mL(g)樣品(液體樣品為1 mL~2 mL,固體為1 g~2 g,兩者皆有時(shí),應各取一半)
如果沒(méi)有微生物生長(cháng),則記錄后棄去。
對有微生物生長(cháng)的培養管,取培養后的內容物的直接涂片,革蘭氏染色鏡檢,記錄觀(guān)察到的微生物。
如果在30 ℃培養條件下在酸性肉湯或麥芽浸膏湯中有微生物生長(cháng),將各陽(yáng)性管分別接種2塊營(yíng)養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板,一塊作需氧培養,另一塊作厭氧培養。
如果在55 ℃培養條件下,酸性肉湯中有微生物生長(cháng),將各陽(yáng)性管分別接種2塊營(yíng)養瓊脂平板,一塊作需氧培養,另一塊作厭氧培養。對有微生物生長(cháng)的平板進(jìn)行染色涂片鏡檢,并報告鏡檢所見(jiàn)微生物型別。
挑取30 ℃需氧培養的營(yíng)養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中的單個(gè)菌落,接種營(yíng)養瓊脂小斜面,用于后續的革蘭氏染色鏡檢。同時(shí)接種酸性肉湯或麥芽浸膏湯進(jìn)行純培養。
挑取30 ℃厭氧培養的營(yíng)養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中的單個(gè)菌落,接種酸性肉湯或麥芽浸膏湯進(jìn)行純培養。
挑取55 ℃需氧培養的營(yíng)養瓊脂平板中的單個(gè)菌落,接種營(yíng)養瓊脂小斜面,用于后續的革蘭氏染色鏡檢。同時(shí)接種酸性肉湯進(jìn)行純培養。
挑取55 ℃厭氧培養的營(yíng)養瓊脂平板中的單個(gè)菌落,接種酸性肉湯進(jìn)行純培養。
挑取營(yíng)養瓊脂小斜面中的培養物涂片鏡檢。挑取30 ℃厭氧培養的酸性肉湯或麥芽浸膏湯培養物和55 ℃厭氧培養的酸性肉湯培養物涂片鏡檢。
將30 ℃需氧培養的純培養物接種于營(yíng)養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中進(jìn)行厭氧培養,將30 ℃厭氧培養的純培養物接種于營(yíng)養瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂平板中進(jìn)行需氧培養,將55 ℃需氧培養的純培養物接種于營(yíng)養瓊脂中進(jìn)行厭氧培養,將55 ℃厭氧培養的純培養物接種于營(yíng)養瓊脂中進(jìn)行需氧培養,以鑒別是否為兼性厭氧菌。
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