對低酸性罐藏食品,每份樣品接種4管預先加熱到100 ℃并迅速冷卻到室溫的庖肉培養基內;同時(shí)接種4管溴甲酚紫葡萄糖肉湯。每管接種1 mL(g)~2 mL(g)樣品(液體樣品為1 mL~2 mL,固體為1 g~2 g,兩者皆有時(shí),應各取一半)
如果有微生物生長(cháng),以接種環(huán)沾取液體涂片,革蘭氏染色鏡檢。如在溴甲酚紫葡萄糖肉湯管中觀(guān)察到不同的微生物形態(tài)或單一的球菌、真菌形態(tài),則記錄并棄去。在庖肉培養基中未發(fā)現桿菌,培養物內含有球菌、酵母、霉菌或其混合物,則記錄并棄去。將溴甲酚紫葡萄糖肉湯和庖肉培養基中出現生長(cháng)的其他各陽(yáng)性管分別劃線(xiàn)接種2塊肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板,一塊平板作需氧培養,另一平板作厭氧培養。
挑取需氧培養中單個(gè)菌落,接種于營(yíng)養瓊脂小斜面,用于后續的革蘭氏染色鏡檢;挑取厭氧培養中的單個(gè)菌落涂片,革蘭氏染色鏡檢。挑取需氧和厭氧培養中的單個(gè)菌落,接種于庖肉培養基,進(jìn)行純培養。
挑取營(yíng)養瓊脂小斜面和厭氧培養的庖肉培養基中的培養物涂片鏡檢。
挑取純培養中的需氧培養物接種肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板,進(jìn)行厭氧培養;挑取純培養中的厭氧培養物接種肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板,進(jìn)行需氧培養。以鑒別是否為兼性厭氧菌。
如果需檢測梭狀芽胞桿菌的肉毒毒素,挑取典型菌落接種庖肉培養基作純培養。36 ℃培養5 d,按照GB/T 4789.12進(jìn)行肉毒毒素檢驗
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