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樣品的運輸與保存
儲存和運輸過(guò)程中保持樣品溫度在0 ℃～5 ℃。實(shí)驗室接到樣品后應盡快進(jìn)行檢測。如果暫時(shí)不能檢測應將樣品保存于-80℃冰箱中。
病毒的富集
無(wú)菌取樣，在5 g檢樣中加入35 mL甘氨酸緩沖液（樣品重量與緩沖液體積之比為1:7）；組織勻漿器中高速勻漿3 min，充分破碎混勻。
將所有均質(zhì)液轉移到50 mL離心管中，37 ℃孵育30 min或室溫下振蕩30min；4 ℃，10000×g離心30 min。
取上清，加入10ml氯仿或更多，充分振搖，放置10min，中間振搖一次，4 ℃，10000×g離心30 min。
取上清至另一干凈的100 mL離心管中，加入等體積的PEG 8000溶液（PEG終濃度為8%），上下顛倒離心管以充分混勻。
冰上放置至少1 h，4℃，10000×g離心5 min。棄去上清，保留沉淀。
病毒RNA的提取和純化使用商品化的病毒RNA 提取試劑盒進(jìn)行RNA 的提取和純化，操作步驟請參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
為防止RNA 降解，所用實(shí)驗用具及溶液應無(wú)RNA 酶，操作過(guò)程中應自始自終佩戴一次性橡膠或乳膠手套，并經(jīng)常更換。
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