固體和半固體樣品:稱(chēng)取25 g 樣品至盛有225 mL 滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10 稀釋液;蚍湃胧⒂225 mL 無(wú)菌蒸餾水的均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打2min,制成1:10 的樣品勻液。
液體樣品:以無(wú)菌吸管吸取25 mL 樣品至盛有225 mL 無(wú)菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶?jì)阮A置適當數量的無(wú)菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10 的樣品勻液。
取1 mL1:10 稀釋液注入含有9 mL 無(wú)菌水的試管中,另?yè)Q一支1 mL 無(wú)菌吸管反復吹吸,此液為1:100 稀釋液。
制備10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1 次1 mL 無(wú)菌吸管。
根據對樣品污染狀況的估計,選擇2 個(gè)~3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進(jìn)行10 倍遞增稀釋的同時(shí),每個(gè)稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于2 個(gè)無(wú)菌平皿內。同時(shí)分別取1 mL 稀釋液加入2 個(gè)無(wú)菌平皿作空白菌落計數25g(mL)樣品+ 225mL 無(wú)菌蒸餾水,均質(zhì)10 倍系列稀釋選擇2 個(gè)~3 個(gè)適宜樣品勻液,各取1mL 分別加入無(wú)菌培養皿內每皿中加入15mL~20mL 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基報 告28℃±1℃ 5d檢樣對照
及時(shí)將15mL~20 mL 冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉動(dòng)平皿使其混合均勻。
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