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樣品處理
冷凍樣品應在45 ℃以下不超過(guò)15 min 或在2 ℃～5 ℃不超過(guò)18 h 解凍，
若不能及時(shí)檢驗，應放于-15 ℃左右保存；非冷凍而易腐的樣品應盡可能及時(shí)檢驗，若不能及時(shí)檢驗，應置于2 ℃～5 ℃冰箱保存，24 h 內檢驗。
樣品制備稱(chēng)取樣品25 g，放入盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內，用旋轉刀片式均質(zhì)器以8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì)1 min～2 min，或放入盛有225 mLPBS 或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2 min。若樣品為10 倍系列稀釋選取3 個(gè)適宜連續稀釋度的樣品勻液，各吸取1mL，分別接種于3 管胰酪胨大豆多粘菌素肉湯接種MYP 瓊脂平板
確證試驗
查MPN 表
報告結果
30 ℃±1 ℃ 24 h～48 h
30 ℃±1 ℃ 48 h±2 h
檢樣
25 g(mL)樣品+225 mL 稀釋液，均質(zhì)液態(tài)，吸取25 mL 樣品至盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jì)瓤深A置適當數量的無(wú)菌玻璃珠)中，振蕩混勻，作為1:10 的樣品勻液。
樣品的稀釋
吸取上述1:10 的樣品勻液1 mL 加到裝有9 mL PBS 或生理鹽水的稀釋管中，充分混勻制成1:100 的樣品勻液。根據對樣品污染狀況的估計，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1 次，換用1 支1mL 無(wú)菌吸管或吸頭。
樣品接種
取三個(gè)適宜連續稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），接種于10 mL胰酪胨大豆多粘菌素肉湯中，每一稀釋度接種3 管，每管接種1 mL（如果接種量需要超過(guò)1 mL，則用雙料胰酪胨大豆多粘菌素肉湯）。于30 ℃±1 ℃培養48h±2 h。
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