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    ONPG試劑緩沖液試驗方法



    錄入時(shí)間:2014-2-26 10:06:02 來(lái)源：海博生物

    緩沖液

    成分

    磷酸二氫鈉（NaH2PO4˙H2O） 6.9 g

    蒸餾水加至 50.0 mL

    制法

    將磷酸二氫鈉溶于蒸餾水中，校正pH至7.0。緩沖液置2 ℃～5 ℃冰箱保存。

    ONPG溶液

    成分

    鄰硝基酚-β-D-半乳糖苷（ONPG） 0.08 g

    蒸餾水 15.0 mL

    緩沖液 5.0 mL

    制法

    將ONPG 在37 ℃的蒸餾水中溶解，加入緩沖液。ONPG 溶液置2 ℃～5 ℃冰箱保存。試驗前，將所需用量的ONPG 溶液加熱至37 ℃。

    試驗方法

    將待檢培養物接種3%氯化鈉三糖鐵瓊脂， 36 ℃±1 ℃培養18 h。挑取1 滿(mǎn)環(huán)新鮮培養物接種于0.25 mL 3%氯化鈉溶液，在通風(fēng)櫥中，滴加1 滴甲苯，搖勻后置37 ℃水浴5 min。加0.25 mL ONPG 溶液，36 ℃±1 ℃培養觀(guān)察24 h。陽(yáng)性結果呈黃色。陰性結果則24 h 不變色。

     

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