大腸埃希氏菌初步生化與鑒定

初步生化試驗

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上挑取5 個(gè)～10 個(gè)典

型或可疑菌落，分別接種TSI 瓊脂，同時(shí)接種MUG-LST 肉湯，并用已知MUG陽(yáng)性的大腸埃希氏菌株做對照，于36℃±1℃培養18h～24h。必要時(shí)進(jìn)行氧化酶試驗和革蘭氏染色。在TSI 瓊脂中，典型菌株為斜面與底層均呈黃色，產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣，不產(chǎn)生硫化氫（H2S）。置MUG-LST 肉湯管于長(cháng)波紫外燈下觀(guān)察，MUG陽(yáng)性的大腸埃希氏菌株應有熒光產(chǎn)生，大腸埃希氏O157:H7/NM 無(wú)熒光；對分解乳糖且無(wú)熒光的菌株，在營(yíng)養瓊脂平板上分純，于36℃±1℃培養18h～24h，并進(jìn)行下列鑒定。

鑒定

血清學(xué)試驗

在營(yíng)養瓊脂平板上挑取分純的菌落，用O157:H7 標準血清或O157 乳膠凝集試劑作玻片凝集試驗。對于H7 因子血清不凝集者，應穿刺接種半固體瓊脂，檢查動(dòng)力，經(jīng)連續傳代3 次，動(dòng)力試驗陰性，H7 因子血清凝集陰性者，確定為無(wú)動(dòng)力株。

生化試驗

用API20E 生化鑒定試劑盒或VITEK-GNI+檢測卡，按照生產(chǎn)商提供的使用

說(shuō)明進(jìn)行。大腸埃希氏菌O157:H7/NM 生化反應特征見(jiàn)表。

生化試驗 特征反應
三糖鐵瓊脂 底層及斜面呈黃色，H2S 陰性
山梨醇 陰性或遲緩發(fā)酵
靛基質(zhì) 陽(yáng)性
MR-VP MR 陽(yáng)性，VP 陰性
氧化酶 陰性
西蒙氏檸檬酸鹽 陰性
賴(lài)氨酸脫羧酶 陽(yáng)性（紫色）
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶 陽(yáng)性（紫色）
纖維二糖發(fā)酵 陰性
棉子糖發(fā)酵 陽(yáng)性
MUG 試驗 陰性（無(wú)熒光）
動(dòng)力試驗 有動(dòng)力或無(wú)動(dòng)力

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