增菌
樣品采集后應盡快檢驗。若不能及時(shí)檢驗,可在2℃~4℃保存18h。以無(wú)菌操作取檢樣25g(mL)加入到含有225mL mEC+n 肉湯的均質(zhì)袋中,在拍擊式均質(zhì)器上連續均質(zhì)1 min~2min;或放入盛有225mL mEC+n 肉湯的均質(zhì)杯中,8000r/min~10000 r/min 均質(zhì)1 min~2min。于36℃±1℃培養18h~24h。同時(shí)做陽(yáng)性及陰性對照。
分離
取增菌后的mEC+n 肉湯,劃線(xiàn)或取0.1mL 涂布接種于改良山梨醇麥康凱
(CT-SMAC)平板和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上,于36℃±1℃培養18h~24h,觀(guān)察菌落形態(tài)。必要時(shí)將混合菌落分純。在CT-SMAC 平板上,典型菌落為不發(fā)酵山梨醇的圓形、光滑、較小的無(wú)色菌落,中心呈現較暗的灰褐色;發(fā)酵山梨醇的菌落為紅色。在改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上為圓形、較小的菌落,中心呈淡紫色-紫紅色,邊緣無(wú)色或淺灰色。
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