1 染色鏡檢:李斯特氏菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌,大小為(0.4 μm~0.5 μm)×(0.5 μm~2.0 μm);用生理鹽水制成菌懸液,在油鏡或相差顯微鏡下觀(guān)察,該菌出現輕微旋轉或翻滾樣的運動(dòng)。
2 動(dòng)力試驗:李斯特氏菌有動(dòng)力,呈傘狀生長(cháng)或月牙狀生長(cháng)。
3 生化鑒定:挑取純培養的單個(gè)可疑菌落,進(jìn)行過(guò)氧化氫酶試驗,過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性反應的菌落繼續進(jìn)行糖發(fā)酵試驗和MR-VP 試驗。單核細胞增生李斯特氏菌的主要生化特征見(jiàn)表1。
4 溶血試驗:將羊血瓊脂平板底面劃分為20 個(gè)~25 個(gè)小格,挑取純培養的單個(gè)可疑菌落刺種到血平板上,每格刺種一個(gè)菌落,并刺種陽(yáng)性對照菌(單增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌)和陰性對照菌(英諾克李斯特氏菌),穿刺時(shí)盡量接近底部,但不要觸到底面,同時(shí)避免瓊脂破裂,36 ℃±1 ℃培養24 h~48 h,于明亮處觀(guān)察,單增李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌在刺種點(diǎn)周?chē)a(chǎn)生狹小的透明溶血環(huán),英諾克李斯特氏菌無(wú)溶血環(huán),伊氏李斯特氏菌產(chǎn)生大的透明溶血環(huán)。
5 協(xié)同溶血試驗 (cAMP):在羊血瓊脂平板上平行劃線(xiàn)接種金黃色葡萄球菌和馬紅球菌,挑取純培養的單個(gè)可疑菌落垂直劃線(xiàn)接種于平行線(xiàn)之間,垂直線(xiàn)兩端不要觸及平行線(xiàn),于30 ℃±1 ℃培養24 h~48 h。單核細胞增生李斯特氏菌在靠近金黃色葡萄球菌的接種端溶血增強,斯氏李斯特氏菌的溶血也增強,而伊氏李斯特氏菌在靠近馬紅球菌的接種端溶血增強。
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