增菌培養
首先是增菌培養基的靈敏度。
關(guān)于食品中是否帶有沙門(mén)氏菌,各個(gè)國家的標準基本上是一樣的,即:25克無(wú)。
過(guò)去的理解是25克食品中不能檢出沙門(mén)氏菌,但是沒(méi)有提出要測定增菌液的靈敏度。
自從PCR試驗技術(shù)推廣應用以后,認為此項技術(shù)能夠在·含有5~10個(gè)細菌的標本內獲得陽(yáng)性結果。才使我們理解到25克無(wú)是應該在25克食品中不能帶有1個(gè)沙門(mén)氏菌。
前增菌
原國標4789.5-2003只對凍肉、乳品、蛋品等加工食品進(jìn)行前增菌,FDA、AOAC、ISO、Canada MFHPB、CCFRA等組織或國家對所有樣品都進(jìn)行前增菌。
現國標改為對所有樣品進(jìn)行增菌
前增菌液:
FDA、AOAC:多種前增菌液可選擇
乳糖肉湯(LB)or 胰酪胨大豆肉湯( TSB)or 煌綠溶液 (BG)or通用前增菌肉湯(UPB)or營(yíng)養肉湯(NB)or 再造脫脂奶粉 or 四硫酸鹽煌綠(TT)
ISO、國標:BPW 8-18h
選擇性增菌培養
國際上常用的沙門(mén)氏菌增菌培養基有3種,即:(1)亞硒酸鹽增菌液或亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,(2)四硫磺酸鹽增菌液或四硫磺酸鹽孔雀綠增菌液,(3)氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)(4)羅伯特增菌液(RVS)(5)亞硒酸煌綠增菌液(SBG)
現行的國家標準采用了(1)亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,和(2)四硫磺酸鹽孔雀綠增菌液。
AOAC:TTB、SC
FDA:RVS、TTB
ISO:RVS、SC
由于沒(méi)有任何一種培養基可以不受食品本身的物理和化學(xué)因素的影響而可以兼顧各種沙門(mén)菌血清型所以較為適當的方法是使用兩種增菌也進(jìn)行平行增菌選擇性增菌的目的是最大可能的檢出沙門(mén)氏菌,原則上必須使用兩種選擇性分離增菌液,一種是抑制除沙門(mén)氏菌以外其腸道菌的生長(cháng)(TTB,)一種是在不影響其他腸道菌生長(cháng)的情況下促進(jìn)沙門(mén)氏菌的生長(cháng)(SC)。選擇不同的增菌液和不同培養基的搭配,找到適合自己的方法可提高樣品檢出率
鑒別培養基
鑒別培養基的目的是將沙門(mén)氏菌分離出來(lái)。
如果增菌液的靈敏度很好,在任何一種鑒別培養基上都會(huì )生長(cháng)許多沙門(mén)氏菌的菌落。