霉菌和酵母菌總數
是指化妝品檢樣在一定條件下培養后,1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落總數,籍以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛生狀況。
本方法根據霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養特性,在虎紅培養基上,置28℃培養72h,計算所生長(cháng)的霉菌和酵母菌數。
操作步驟
1、將無(wú)菌棉試子蘸取無(wú)菌生理鹽水,在每只拖鞋鞋面與腳趾接觸處5cm×5cm面積上,有順序地均勻涂抹3次(一雙鞋鞋為一份樣品)后,用滅菌剪刀將棉試子手執部分剪斷,將棉試子放入10mL裝有玻璃珠的無(wú)菌鹽水管中。
2、將盛有棉試子的鹽水管在手心用力震蕩100次,再用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸50次,使霉孢子充分散開(kāi)。此液為1:10稀釋液。
3、用滅菌吸管吸取1:10檢液2ML,分別注入到2個(gè)滅菌平皿內,每皿1ML。令取1ML注入9ML加有玻璃珠的滅菌鹽水管中,換一支1ML滅菌吸管吸吹5次,此液1:100稀釋液。
4、按上述操作順序作10倍稀釋,每稀釋一次,換一支1ML滅菌吸管,根據樣品的污染情況,選擇3個(gè)合適的稀釋度。
5、將溶化并冷卻至45℃左右的培養基注入滅菌的平皿中,待瓊脂凝固后,倒置于25~28 ℃溫箱中,3天后開(kāi)始觀(guān)察,共培養觀(guān)察一周。
6、計算方法:通常選擇菌落數在30~100之間的平皿進(jìn)行計數,同稀釋度的兩個(gè)平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每毫升檢樣中所含真菌數。若有兩個(gè)稀釋度的菌落數皆在規定范圍之間或三個(gè)稀釋度皆不在此范圍時(shí),應參照細菌總數的報告方式報告。
7、結果報告: m=n×k
m-真菌菌落數,cfu/50cm2(一雙拖鞋涂抹面積)
n-每皿的平均真菌菌落數;
k-稀釋倍數;
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