公共場(chǎng)所毛巾、床上臥具微生物檢驗方法

細菌總數測定

指被檢樣品經(jīng)過(guò)采樣處理，在一定條件下培養后（含培養基成分、培養溫度、培養時(shí)間、pH值、需氧性質(zhì)等），25cm2表面上所含菌落的總數。本方法規定的培養條件下所得結果，只包括一群在營(yíng)養瓊脂上生長(cháng)發(fā)育的嗜中溫性需氧菌落總數。

檢測細菌總數主要作為判定公用毛巾、床上臥具被污染的程度的標志，及清洗消毒效果的判定和評價(jià)提供依據。

操作步驟

1 采樣方法

  1）隨機抽取清洗消毒后準備使用的毛巾、床上臥具。

  2）用滅菌生理鹽水濕潤棉拭子，在毛巾、枕巾對折后兩面的中央各25cm2（5cm×5cm）面積范圍；床單、被單在上下兩部各25cm2范圍內有順序地來(lái)回涂抹，用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分，將棉簽手接觸的部分，將棉拭子放入10mL生理鹽水內，4h內送檢。

2 檢驗方法

   1）將放有棉拭子的吸管充分振搖。此液為1：10稀釋液。

   2）以無(wú)菌操作，吸取2mL檢樣，分別注入到兩塊滅菌平皿內，每皿1mL。如污染嚴重，可十倍遞增稀釋?zhuān)�即吸�?mL加到9mL滅菌生理鹽水中，混勻，此液為1：100稀釋液。每個(gè)稀釋度做兩塊平皿。

   3）將已融化冷至45℃左右的營(yíng)養瓊脂培養基傾入平皿，沒(méi)皿約15mL，并立即旋搖平皿。冷凝后放36℃±1℃培養箱培養48h。

菌落計數方法

       作平皿菌落計數時(shí)，可用肉眼觀(guān)察，必要時(shí)用放大鏡檢查以防遺漏，在記下各平皿的菌落計數后，求出同一稀釋度各平皿生長(cháng)的平均菌落數。若平皿中有連成片狀的菌落，該平皿不宜計數；若片狀菌不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計數后乘2，代表全皿菌落數。

     公用毛巾、床上臥具細菌總數按公式（1）計算：

                   m=k·n /2       ¨¨¨¨¨¨（1）

       式中：m——細菌總數，cfu/25cm2

                  k——稀釋倍數；

                  n——平均菌落數。

菌落報告方式

  GB/T  18204.2—2000中的第9章

大腸菌群

 指一群在37℃、24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無(wú)芽孢桿菌。

    該菌主要來(lái)源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標來(lái)評價(jià)公用毛巾、床上臥具的衛生質(zhì)量。

操作步驟

紙片法：用滅菌生理鹽水濕潤5cm×5cm大腸菌群快速測定紙片兩張，分別粘貼在毛巾、床上臥具規定部位和面積范圍內，約30s后取下，置于無(wú)菌塑料袋內。將已采樣的紙片置36℃±1℃培養箱內培養16~18h，觀(guān)察結果。

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