即最低(或最。┮志鷿舛龋∕IC)的測定。
基本原理:
在肉湯或瓊脂中將抗菌藥物進(jìn)行一系列(對倍)稀釋后,定量接種待檢菌,35度孵育24h后觀(guān)察。抑制待檢菌肉眼可生長(cháng)的最低藥物濃度,即為該藥物對待檢菌的最低抑菌濃度。
試驗方法
1. 取無(wú)菌試管2排,分別為待檢菌菌液管和質(zhì)控菌菌液管,管中為經(jīng)肉湯倍比稀釋的抗菌藥物。(不同抗菌藥物對不同的特定細菌所設置的抗菌藥物梯度不同。)
2.另再取3支試管,分別作為肉湯對照管、待檢菌生長(cháng)對照管和質(zhì)控菌生長(cháng)對照管。
3. 加入不同濃度的含抗菌藥物的肉湯和菌懸液后(加入菌懸液的最終濃度-肉湯稀釋法105CFU/ml,瓊脂稀釋法為104CFU/點(diǎn)),置35度培養箱中孵育18-24h,觀(guān)察有無(wú)細菌生長(cháng)。
例:
取無(wú)菌試管26支,排成2排。每管加入MH肉湯2ml,在第一管加入經(jīng)MH肉湯稀釋的藥物原液(256mg/L)2ml混勻,然后吸取2ml至第2管,混勻后再吸取2ml至第3管。如此連續對倍稀釋至第13管,并從第13管中吸取2ml棄去。
此時(shí)各管含藥濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/L。
第1排試管每管加入待檢菌菌液(1×107CFU/ml)0.1ml,第2排試管每管加入質(zhì)控菌菌液(1×107CFU/ml)0.1ml,最終接種菌量約為5×105CFU/ml
結果判斷
藥物最低濃度管無(wú)細菌生長(cháng)者(對照管細菌生長(cháng)良好),即為待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)。
下一篇:生活飲用水中總大腸菌群檢測