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除酒精飲料以外，凡殺菌后平衡pH大于4.6，水分活度大于0.85的罐藏食品，原來(lái)是低酸性的水果、蔬菜或蔬菜制品，為加熱殺菌的需要而加酸降低pH的，屬于酸化的低酸性罐藏食品。
B.2.1 對低酸性罐藏食品，每份樣品接種4管預先加熱到100 ℃并迅速冷卻到室溫的庖肉培養基內；同時(shí)接種4管溴甲酚紫葡萄糖肉湯。每管接種1 mL（g）～2 mL（g）樣品(液體樣品為1 mL～2 mL，固體為1 g～2 g，兩者皆有時(shí)，應各取一半)。培養條件見(jiàn)表B.1。
表B.1 低酸性罐藏食品（pH＞4.6）接種的庖肉培養基和溴甲酚紫葡萄糖肉湯
|
培養基 |
管數 |
培養溫度℃ |
培養時(shí)間h |
|
庖肉培養基 |
2 |
36±1 |
96～120 |
|
庖肉培養基 |
2 |
55±1 |
24～72 |
|
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 |
2 |
55±1 |
24～48 |
|
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 |
2 |
36±1 |
96～120 |
B.2.2 經(jīng)過(guò)表B.1規定的培養條件培養后，記錄每管有無(wú)微生物生長(cháng)。如果沒(méi)有微生物生長(cháng)，則記錄后棄去。
B.2.3 如果有微生物生長(cháng)，以接種環(huán)沾取液體涂片，革蘭氏染色鏡檢。如在溴甲酚紫葡萄糖肉湯管中觀(guān)察到不同的微生物形態(tài)或單一的球菌、真菌形態(tài)，則記錄并棄去。在庖肉培養基中未發(fā)現桿菌，培養物內含有球菌、酵母、霉菌或其混合物，則記錄并棄去。將溴甲酚紫葡萄糖肉湯和庖肉培養基中出現生長(cháng)的其他各陽(yáng)性管分別劃線(xiàn)接種2塊肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板，一塊平板作需氧培養，另一平板作厭氧培養。培養程序見(jiàn)圖B.1。
B.2.4 挑取需氧培養中單個(gè)菌落，接種于營(yíng)養瓊脂小斜面，用于后續的革蘭氏染色鏡檢；挑取厭氧培養中的單個(gè)菌落涂片，革蘭氏染色鏡檢。挑取需氧和厭氧培養中的單個(gè)菌落，接種于庖肉培養基，進(jìn)行純培養。
B.2.5 挑取營(yíng)養瓊脂小斜面和厭氧培養的庖肉培養基中的培養物涂片鏡檢。
B.2.6 挑取純培養中的需氧培養物接種肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板，進(jìn)行厭氧培養；挑取純培養中的厭氧培養物接種肝小牛肉瓊脂或營(yíng)養瓊脂平板，進(jìn)行需氧培養。以鑒別是否為兼性厭氧菌。
B.2.7 如果需檢測梭狀芽胞桿菌的肉毒毒素，挑取典型菌落接種庖肉培養基作純培養。36 ℃培養5 d，按照GB/T 4789.12進(jìn)行肉毒毒素檢驗。
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