螺旋平板法-接種方法

1 一般要求

使用螺旋接種儀將樣品接種在平板上。樣品接種后，菌落即分布在螺旋軌跡上，隨半徑的增加分布得越來(lái)越稀。采用特殊的計數柵格，自平板外周向中央對平皿上的菌落進(jìn)行計數，即可得到樣品中微生物的數量。

2 實(shí)驗步驟

取制備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液，以選定的模式接種于實(shí)驗所用平板，每個(gè)稀釋度接種兩塊平板，接種每一個(gè)樣品前后均按儀器設定程序對螺旋接種儀進(jìn)行清洗消毒。

按相同接種模式接種懸浮液作為空白對照。

將平板按標準方法中規定的培養時(shí)間和溫度進(jìn)行培養后，計數每個(gè)平板菌落數，并記錄下來(lái)。

3 菌落總數的計算和記錄

平板上菌落數符合菌落計數儀規定計數范圍的為合適范圍。如果兩個(gè)稀釋度的四個(gè)平板菌落數均在合適范圍內，則將四個(gè)平板菌落數的平均值作為每克（毫升）樣品中的菌落數；如果只有一個(gè)稀釋度的兩個(gè)平板菌落數在合適范圍內，則將這兩個(gè)平板菌落數的平均值作為每克（毫升）樣品中的菌落數。

當低稀釋度的兩個(gè)平板菌落數都少于合適范圍的下限時(shí)，計算這一稀釋度兩個(gè)平板菌落數的平均值作為每克（毫升）樣品中的菌落數。給這個(gè)數注上星號（*），表明該數是從菌落數在計數范圍之外的平板估計所得。當所有平板上的菌落數都超過(guò)合適范圍的上限時(shí)，計算高稀釋度兩個(gè)平板菌落數的平均值作為每克（毫升）樣品中的菌落數，給這個(gè)數注上星號（*）。如果所有稀釋度的平板都沒(méi)有菌落，則以小于1乘以稀釋倍數和接種體積作為每克（毫升）樣品中的菌落數，給這個(gè)數注上星號（*）。

記錄時(shí)，只有在換算到每克（毫升）樣品中的菌落數時(shí)，才能定下兩位有效數字，第三位數字采用四舍五入的方法記錄。也可將樣品的菌落數記錄為10的指數形式。

4 結果的表述

根據F.3歸檔計算出每克（毫升）樣品的菌落數，固體樣品以CFU/g為單位，液體樣品以CFU/mL為單位。

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