(1) 取10mL預增菌液加入lOOmL亞硒酸鹽胱氨酸肉碭中,另取l0mL加入R-V (Rappaport - Vamliadis)培養基:
用綏沖蛋白胨水對樣品進(jìn)行預增菌,再將增菌液轉接到亞硒酸鹽胱氨酸肉湯中可用 于分離志賀氏菌:但因志賀氏菌很容易被樣品中其他微生物抑制,因此最好不用預增菌, 直接將25g樣品加人225mL的GN肉楊中進(jìn)行選擇性增菌。
(2) 如果食品不需要非選擇復蘇,則可直接取25g樣品加人250mL亞硒酸鹽胱氨酸 肉湯;同時(shí)將5g食品加人500rnL R - V培養基中’另外將25g樣品加人250mL GN肉湯 中進(jìn)行增菌培養。注意在接種R-V培養基時(shí),不能用1: 10的常規接種比率,否則會(huì )削 弱這種選擇培養基的有效性
將亞硒酸鹽胱氨酸肉湯和肉湯在37℃培養48h.R- V培養基在42℃培養18〜 24h,培養后在固體選擇培養基平板上劃線(xiàn)接種,R-V培養基再培養48h,然后冉次劃線(xiàn) 接種到固體平板培養基。
Harvey和Price({968&1974)認為將樣品加入亞硒酸鹽肉湯,43℃培養后,再在37℃ 進(jìn)行非選擇復蘇能較好地分離沙門(mén)氏菌。但在43℃時(shí),經(jīng)加熱滅菌的亞硒酸鹽肉湯對沙 門(mén)氏菌會(huì )產(chǎn)生毒性:所以,在制備培養基吋必須采用過(guò)濾滅菌.
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