培養基:三丁酸甘油酯瓊脂培養基,是在酵母浸膏瓊脂中加入三丁酸甘油酯制成, pH為7,5三丁酸甘油酯加入后,會(huì )發(fā)生乳化作用,因此,制作時(shí)最好用電動(dòng)混合器或電 動(dòng)攪拌器作為攪拌工具。連續3d蒸汽滅菌,每次30min。培養基可鋪成平板使用,先將 酵母浸膏瓊臘培養基鋪成平板,再將5mL熔化的二丁酸甘油酯瓊脂培養基覆蓋在酵母浸 膏瓊I旨上。也可以使用市售的配制好的培養基。
平板劃線(xiàn)接種,橫穿表面劃線(xiàn)一次,在最佳生長(cháng)溫度培養2~14dc 結果記錄:三丁酸甘油酯水解使培養基變得透明,井形成一個(gè)清晰環(huán)帶,以毫米為單 位記錄下從菌落邊緣到清晰環(huán)帶邊緣的寬度。該反應通常被認為是脂肪酶的典型反應, 但sierra(1964)曾報道,雖然三丁酸甘油酯不是結構復雜的脂肪,細菌的蛋白水解酶也能 將其水解。
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