刃天青試驗步驟

刃天青的還原反應為兩個(gè)階段，首先不可逆的形成試鹵靈，顏色由藍色和紫色變?yōu)榉?紅色，然后可逆地從試鹵靈變?yōu)闊o(wú)色的二氫雷瑣辛，可用Lovibond比色計（如從Merck獲 得)進(jìn)行試驗比色。Merck給出了從0(無(wú)色)經(jīng)1(粉紅色)到6(藍色）的一組顏色的變化 對照。

①制備刃天青溶液：將一片標準片劑（Mcrck)加人到50mL冷卻的無(wú)菌蒸餾水中， 制成0,005%的刃天青標準溶液。溶液中的刃天青在光照下不穩定，因此不使用時(shí)，溶液 應保存在陰涼避光處,最好保存于冰箱，超過(guò)8h應棄掉。

②將待測樣品徹底混合,然后加10mL奶于測試管中。

③加入lmL刃天青溶液,將吸管靜置3s后，吹出剩余液滴，吸管不要接觸奶或濕試 管壁。

④無(wú)菌橡皮塞塞住測試管，然后將測試管緩慢倒置2次(4s),將染色劑和奶混勻。

⑤將試管放入（37.5±0.5）℃水浴中記錄試管放入時(shí)間。測定大量樣品時(shí)，水浴中 的刃天青的測試管不應超過(guò)10個(gè)。lOmin排斥試驗不應超過(guò)5個(gè),水浴時(shí)應加 蓋避光。

⑥培養時(shí)間取決于試驗的特定要求，到規定時(shí)間時(shí)，取出并觀(guān)察每個(gè)試管，完全還原的試管呈現白色，記錄為0；呈現粉白色的試管或白色和粉色摻雜的，記錄為1/2.將其他試管倒置，迅速用比色計比色如下：

在比色計的左邊放置一個(gè)沒(méi)有染色劑的混合奶空白試管，培養后的試管置于右邊，比色計要有良好的自然光源或標準人造光源。將比色計放在工作臺上，從兩個(gè)空隙觀(guān)察轉動(dòng)盤(pán)，直到與培養試管的顏色相同，記錄轉盤(pán)的次數，當顏色居于兩個(gè)讀數之間時(shí)，記為半值

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