海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
操作步驟
全脂奶檢測中，在用亞甲基藍、改良的Newman染色劑或Charlett染色劑對樣品著(zhù)色前，對牛奶涂片進(jìn)行脫脂十分必要。使用Ne_an染色劑，干 燥的涂片需著(zhù)色10mm,之后烘干，在水中清冼，之后再烘T;使用Charlett染色劑，干燥 的涂片僅需著(zhù)色10~30s，載玻片在清洗之前不必烘干，上述兩種染色劑中均包栝作為 細胞染色劑的亞甲基藍。
兩種配方中都有用作脫脂劑的1，1，2，2_四氯乙烷，也可用毒性較小的1，1，1_三氯 乙烷代替此試劑。操作時(shí)應使用通風(fēng)櫥，以免吸人有害蒸氣。
體細胞和微生物染色后呈藍色，但在ChaHett染色劑中，堿性品紅使得牛奶蛋白呈現 粉紅色背景。使水平熱平板或扇形干燥器進(jìn)行干燥。
Whiteside黏度試驗這是診斷乳腺炎的一種簡(jiǎn)單、快捷、間接的測試方法,也是 一種估計牛奶中細胞數量的間接方法。在患乳腺炎牛的奶中，當細胞數量很大吋，用堿滴 定奶液,細胞中釋放出的核酸能產(chǎn)生明顯的黏度.
操作步驟
將1份lmol/L NaOH與5份奶或乳房分泌液在玻璃盤(pán)或碟中混合,用玻璃棒攪拌約15S
記錄黏滯性產(chǎn)生的情況。隨細胞數里的增加黏滯性增強，若無(wú)黏滯性增強，則記錄為 陰性，表明牛奶正常。
培養檢測法引發(fā)乳腺炎的微生物分離通常是用劃線(xiàn)或倒平板技術(shù)從單個(gè)1/4 樣品中得到的，所用的培養基應適合大部分乳腺炎微生物的生長(cháng)，必要用選擇性培養基分 離特殊菌種。最好的非選擇件培養基是5%血瓊脂,但這種培養基在使用時(shí) 會(huì )產(chǎn)生溶血 *
Edward七葉苷結晶紫血瓊脂培養基是一種選擇性培養 基，能用于乳腺炎鏈球菌的分離。選擇性試劑為結晶紫，其使用濃度為1:500000鏈球 菌可在該培養基上生長(cháng)，而葡萄球菌等則受到抑制。乳腺炎鏈球等發(fā)酵七葉苷的微生物 能產(chǎn)生黑色菡落，而不發(fā)酵七葉駐的微生物（如無(wú)乳鏈球菌和停乳鏈球菌）則產(chǎn)生無(wú)色 菌落。
化膿性鏈球菌的另一種選擇性培養基是磷脂酰乙醇胺黏菌素1，2，3，4 -萘四酮酸血 瓊脂培養基(COBA) 1,2,3,4-萘四酮酸岳一種與萘啶酮酸相似的抗菌成 分，能抑制革蘭氏陰性菌和葡萄球菌。
分離步驟
用4mm接種環(huán)將O.OlmL奶劃線(xiàn)于預先準備好的干燥[flL瓊脂平板表面，當檢驗取白 同一個(gè)奶牛的4個(gè)1/4樣品時(shí)，在同—平板的不同K域劃線(xiàn)。37℃培養48h，在24~48h 進(jìn)行檢測。因接種時(shí)使用的是固定的數鱟，因而可與單個(gè)1/4樣品進(jìn)行比較，記錄所有的 溶血菌落。
分離平板上生長(cháng)的大部分菌落為可疑菌：記錄具有代表性菌落的形狀、大小、溶血 (如果冇）、著(zhù)色、革蘭氏反應和形態(tài)，這樺觀(guān)察結果能確定菌株的種類(lèi)，但必要時(shí)還需做進(jìn) 一步的測試。此時(shí)對可疑的葡萄球菌進(jìn)行載玻片凝固酶測試非常方便。陽(yáng) 性反應表明存在金黃色葡萄球�？梢涉溓蚓柽M(jìn)行生理試驗，也可用沉淀素試驗分離尖地鏈球菌。
如果檢測出引發(fā)乳腺炎的致病菌，表明動(dòng)物可能發(fā)生了臨床或亞臨床的乳腺炎，這時(shí) 需進(jìn)一步檢測該致病菌對抗生素的敏感性。 -
藥敏試驗
抗生素的選擇對乳腺炎的治療非常重要。從患病乳牛的牛乳中分離的致病菌純菌株可用于藥敏試驗。
將分離的致病菌接種到適當的肉湯培養基（營(yíng)養肉湯或酵母膏葡萄糖Icmco肉湯） 中，37℃培養24h將O.lmL培養物接種于預先鋪好并干燥的瓊脂平板上（葡萄球菌對 用營(yíng)養瓊脂，鏈球菌可用酵母膏葡萄糖肉汁瓊脂），用無(wú)菌棒涂布平板，放至微干，用紙片
笫二部分特殊食品的微生物檢測
分放器在瓊脂表面放置一系列適當的抗生素紙片（也可使用經(jīng)火焰灼燒過(guò)的無(wú)菌鑷子）。 從制造商處可買(mǎi)到紙片和紙片分放器
37℃培養24h，記錄紙片周?chē)囊志χ睆�。抑菌圈的大小表明菌株對特定抗生�?的敏感程度對于乳腺炎的治疔十分重要。但應注意:紙片周邊出現較大抑菌圏的抗生 素，其療效并不一定比產(chǎn)生小抑菌圏的抗生素療效好.因為很多因素會(huì )影響抑菌圈的大小 (Cooper,1955Linton, 1961),這種方法通過(guò)抗生素的抑菌圏檢測其最小抑制濃度，一個(gè) 簡(jiǎn)單方法是Difco公司的E-測試法，這種方法使用了一種可放置在已接種平板上的抗生 素梯度條。
上一篇：乳和乳制品檢測概述
下一篇：刃天青試驗步驟
