瑞士奶酪中丙酸桿菌的分離

用van Niel的酵母浸膏乳酸鹽肉湯（見(jiàn)325頁(yè)）從瑞士奶酪屮分離到乳酸菌。 這種培養基之所以稱(chēng)之為選擇培養基是因為它能提供滿(mǎn)足丙酸菌生長(cháng)而抑制其他菌生長(cháng) 的最小的營(yíng)養成分，需要時(shí)可以用它做丙酸桿菌的計數。在原始的van Niel肉湯培養基 中加人瓊脂就可制成半固體培養基。培養基中的乳酸發(fā)酵可以產(chǎn)生二氧化碳，所以，若培 養后培養基產(chǎn)生分裂，則可懷疑有丙酸菌存在。如可能應在由Gas Pak®系統 提供5%的CO2厭氧狀態(tài)下分離丙酸菌。

操作步驟

(1) 制備稀釋液，在45℃接種熔化的酵母膏乙酸半固休瓊脂，在手中轉動(dòng) 試管充分混勻，立至冷卻，表面用冷卻至45℃的2%瓊脂封住，30℃培養。最好在5%的 二氧化碳厭氧的環(huán)境中培養7〜10d。

(2) 試管的培養基表面若出現氣體裂縫則認為有可疑的丙酸菌，用顯微鏡觀(guān)察并進(jìn) 一.步轉接培養驗證。丙酸菌為小的革蘭氏陽(yáng)性球桿菌，無(wú)運動(dòng)性。通過(guò)這些特征能很容 易地將它與培養基中的大腸菌群和梭狀芽孢桿菌區分開(kāi)。記錄產(chǎn)生裂縫的最髙稀釋度， 得出每克奶酪中丙酸菌的佔計值。

(3) 從一個(gè)可疑的陽(yáng)性管中取一環(huán)菌劃線(xiàn)于酵母膏乙酸瓊脂，30℃培養5〜7d后，再 用5%的二氧化碳厭氧培養或將層狀平板置于富含二氧化碳的環(huán)境中需氧培養，最好采 用厭氧培養法：

(4) 選擇單個(gè)菌落：革蘭氏染色后觀(guān)察，將可疑菌落轉接到酵母浸膏乳酸鹽肉湯或 酵母葡萄糖肉汁湯中，30℃培養,需要時(shí)應再次劃線(xiàn)分離。

(5) 分離的純菌株穿刺接種到酵母葡萄糖肉汁瓊脂中，培養到有菌長(cháng)出， 然后表面用滅菌的液體石蠟覆蓋。

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