乳球菌和鏈球菌
使用中性紅白堊乳糖瓊脂培養基,可以在不同的培養溫度下分離不同菌種。例如 30℃下以從酸奶和黃油奶培養物中分離乳球菌,37〜43℃可以從酸奶屮分離嗜熱鏈球菌 后者的分離也可用L - S鑒別培養基)c
在鑒別培養基中加入1:2000的醋酸鉈能很好的抑制大腸菌群選擇忭分離革蘭氏陽(yáng)性菌。例如能從生酸奶中分離鏈球菌。
在中性紅白堊乳糖瓊脂培養基上,乳球菌、鏈球菌的產(chǎn)酸菌落很小,呈深紅色,酸度增 加溶解了培養基中的白堊周?chē)霈F了清晰環(huán)帶。
用接種針挑選可疑乳球菌和鏈球菌,穿刺于石蕊乳培養基,進(jìn)行傳代培養; 也可制備涂片,革蘭氏染色后鏡檢,以證實(shí)是否存在革蘭氏陽(yáng)性球菌石蕊牛奶培養基在 30℃或37℃培養至產(chǎn)酸,重新檢測。在固體培養基上重新劃線(xiàn)能得到純菌種
乳酸桿菌
用Kogosa瓊脂等選擇性培養基,冉覆蓋一層5mL熔化的瓊脂可以分離 乳酸桿菌。根據所分離的乳酸桿菌的不同特性確定其培養溫度。低溫下生長(cháng)良好的鏈桿 菌屬和乳桿菌屬細菌(例如干酪乳桿菌),要求在30℃培養。乳桿菌屬中的嗜熱桿菌亞屬 (例如嗜酸乳桿菌和保加利亞乳桿菌)能在較高溫度生長(cháng),需在37℃培養。用L-S鑒別 培養棊可以檢測酸奶中的德氏乳桿菌,也可從嗜熱鏈球菌中區分出該菌。
選取單個(gè)菌落鏡檢,將革蘭氏陽(yáng)性桿菌(可疑的乳桿菌)的菌落種到石蕊牛奶培養基中,如前文所述進(jìn)行再次培養,長(cháng)出后應重新檢測培養物:如需要進(jìn)一步鑒別,必須先在固體培養基上將菌種純化。
酵母菌
酵母菌的選擇應使用高酸度的選擇性培養基以抑制其他菌種的生長(cháng),例如可使用麥 芽浸膏瓊脂或Davis酵母鹽瓊脂,兩者pH均為3.5。于22℃或25℃培養3 -5d。挑取單個(gè)酵母菌菌落接種到麥芽膏 瓊脂斜面,純化后做進(jìn)一步的研究。將純菌株接種到含有葡萄糖、半乳糖和乳糖等一系列 糖發(fā)酵培養基上分離后,可以檢測菌株的發(fā)酵能力。
污染菌株的檢測
用平板劃線(xiàn)法和適當的選擇性培養基可以檢測發(fā)酵菌種中的污染菌,對照檢索表進(jìn) 行菌種的純化和分離。
值得注意的是工廠(chǎng)衛生標準巾對大腸菌群的檢測應限于樣品生產(chǎn)出后的Mh內進(jìn) 行。因為在儲存期間大腸菌群會(huì )逐漸死亡—酵母菌娃潛在的腐生微生物。數量少時(shí),用 多管技術(shù)和pH為3.5的Davis酵母鹽肉湯進(jìn)行選擇性培養計數(酵母菌需用顯微鏡加以 證實(shí)并檢查管中是否產(chǎn)氣。
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