國際食品微生物專(zhuān)業(yè)委員會(huì )(ICMSF,1978)建議在檢測低污染樣品時(shí),選用磷酸鹽 緩沖蛋白胨水或胰蛋白胨大豆肉湯(含牛膽汁和亮綠,321〜322頁(yè))進(jìn)行前增菌,然后再 用腸道菌增菌肉湯進(jìn)行選擇性增菌。再接種紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂選擇可疑菌株。發(fā)酵葡 萄糖的菌落為轉化酶陰性。具體方法見(jiàn)ISO 8523:1991對于髙污染樣品的檢測,可以 省略非選擇性增菌的步驟,用最大可能值(MIN)方法和菌落計數法計數(見(jiàn) ISO 7402:1993)o
總腸道菌計數,需要先制備10倍系列稀釋液,然后傾倒紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂 (VRBGA),選擇每克含10~100個(gè)菌落的平板計數。每個(gè)平板加15mL VRDGA (45V熔化),與接種物混勻,靜置,待瓊脂凝固后在瓊脂表面再加5mL 45的VRBGA瓊 脂。凝固后,在適當的溫度條件下培養24hISO標準推薦使用的溫度為35℃或37℃。 但這類(lèi)細菌中的一些菌株在35℃或更高的溫度下生長(cháng)不良(或無(wú)生化活性)閃此,要得到真實(shí)的總腸道菌數,使用30℃的溫度培養較合適,因為這時(shí)計數結
果較高。但當要求必須使用ISO標準時(shí),則只能按要求進(jìn)行〖除非計數在35℃或37℃ 以及30℃同時(shí)進(jìn)行]。但仍建議將兩套平皿同時(shí)在30℃和35℃(或37℃)培養,并對同一 樣品在不同溫度下的計數結果進(jìn)行比較和統計分析,以便決定哪個(gè)培養溫度更適用,從而 更好完成這類(lèi)菌的檢測工作。
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