大腸桿菌O157的暴發(fā)是由未經(jīng)巴氏消毒的蘋(píng)果酒所引起的,隱孢子 菌病同樣是由未經(jīng)巴氏消毐的蘋(píng)果酒引起的。
野生酵母菌在含有放線(xiàn)菌酮的培養基巾比其他類(lèi)型的酵母菌株生存能 力更強。在培養棊中加入白萬(wàn)分之十的環(huán)己酰胺吋用于檢測畢赤酵母和圓酵母。但是,酒的酵母菌和波爾多葡萄酒的 發(fā)酵酵母在含冇放線(xiàn)菌酮培養基和下文介紹的賴(lài)氨酸瓊脂中問(wèn)樣能夠生長(cháng)。顯然在這種 情況下酵母菌并不都是導致產(chǎn)品變質(zhì)的菌種。放線(xiàn)菌酮培養某也適用于細菌總數的檢測,因為細菌問(wèn)樣能在這樣的環(huán)境中生長(cháng)。
較好的計數培養基為每毫升平板計數瓊脂中加20g葡萄糖和3g麥芽育。同時(shí)制備 兩份這樣的培養基,將-份的pH調至7. 0T另一份調至4. 0,放線(xiàn)菌酮可直接加入培養 基后滅菌,或在滅菌后倒平板時(shí)加人。如果采用后一種方法,可以先準備0. 1%的儲備 液,過(guò)濾滅菌或高壓滅菌。取】mL加人100mL熔化的瓊脂培養基中混勻后立即倒培養 板。這樣的培養基為樣品中的大部分細菌和酵母菌提供了豐富的營(yíng)養。造成啤灑廠(chǎng)或釀酒廠(chǎng)污染的乳酸桿菌在MRS等培養基不能生長(cháng),只有當在這類(lèi)培養基屮加人了啤灑花(Kirsop和Hulezil,1975)或過(guò)濾滅菌的灰芽浸膏和酵母浸膏(Bryan -知ncs, 1975)后它才能夠生長(cháng)。
將兩套平板分別在耑氧和厭氧環(huán)境下30T:培養。引起腐敗變質(zhì)的微生物有:乳桿 菌片球菌、醋酸捍菌和運動(dòng)發(fā)酵單胞菌 運動(dòng)發(fā)酵單胞菌在釀酒業(yè)是一種重要的腐敗微生物,侖可導致產(chǎn)品渾 濁而失去原有的風(fēng)味。
然而某些傳統的酒中卻存在上述這些微生物(Stdnkraus等,1983)而不引起酒的變 質(zhì),如在龍舌蘭灑和棕櫚發(fā)酵彳0巾存在有酵母菌、乳酸捍菌和運動(dòng)發(fā)酵單胞菌,乳酸桿菌在棕櫚酒中也能正常生存:
當預測產(chǎn)品的污染程度較低時(shí),可用多管技術(shù)檢測微生物。相對而言,膜過(guò)濾技術(shù)較 適用于大樣品屮的微生物的檢測,但這項技術(shù)在實(shí)踐中儀能用于已過(guò)濾的產(chǎn)品或已澄淸的液體產(chǎn)品的檢測。它能檢測到10L液體中的一個(gè)細菌。
柃測汴多野生酵母的另一種培養基是賴(lài)氪酸瓊脂,但它的檢測范®是布限的(Morris 和Eddy,1957h如啤灑酵母和卡爾酵母就不能利用賴(lài)氨酸作為惟一氮源,而許多其他酵 母菌能利用這種氨基酸,因此賴(lài)氨酸瓊脂是一種選擇性培養基,它可以通過(guò)脫水制成。當賴(lài)氨酸瓊脂用于檢測野生酵母時(shí),必須用蒸餾水洗滌和離心酵母懸液三次以上,以確保培 養基中無(wú)細胞外氮源,將顆粒狀沉淀用已知體積的無(wú)鹵蒸餾水再次懸浮。這個(gè)培養基更 適于檢測樣品中的野生酵母菌的濃度。另外,平板上的接種量也是非常重要的,每個(gè)平板上的酵母的數量應為104〜106個(gè)。
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