培養基pH的測定和調整

培養基pH的測定和調整

所有微牛物都受到其生存環(huán)境中PH的影響e通常，選擇性物質(zhì)的存在會(huì )縮小它們 生長(cháng)的PH范圍。有時(shí)，培養基的酸度或堿度也能作為一種生長(cháng)選擇因子。而對于生化 測試培養基，微生物在基質(zhì)中顯tk活性的pH的范圍比生長(cháng)所耑的PH范圍窄：因此，將培養基的PH調至預斯的范圍內是很蓽要的。當實(shí)驗室根據培養基成分自己配制培養基 時(shí)，必須檢測并調整pH。必須指出的是，即使是生產(chǎn)廠(chǎng)商提供的現成的合成脫水培養基 (尤其是對些庫存的脫水培養基），在制成實(shí)驗用培養基后也需要對其最終PH進(jìn)行測定。 測定培養基pH的最準確的方法是使用pH計。使用前必須用已知pH的（通常PH 為4〜7)標準緩沖溶液進(jìn)行校準。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養基中，就呵以從pH汁的刻度讀出培養基的pH。每個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)商對每種不同pH計都提供有 詳細的操作說(shuō)明。

配制培養基時(shí)，使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調整pH培養基應在能夠不停攪拌的荇器(如大燒杯）中配制，最好使用磁力攪拌器，磁力攪拃器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養基需在融化后調整其pH，用可加熱的磁力攪拃器很容易辦到。調節pH時(shí)用巳知pH的標準緩沖液溶液先對pH計迸行 校準。然后將復合電極和電阻溫度計(如果有)置于培養基屮，從燒杯遠離電極的一端緩 慢加入適量的鹽酸和氣氧化鈉，佴到培養基達到并保持所需的pH。

PH計的溫度補償應考慮到溫度對電極系統的影響：在一些稀釋液和培養基中，pH隨溫度的變化而有相當大的變化。對于液體培養基和稀釋液而言，pH通常既可以在 251:下,也可以在其使用時(shí)的溫度下調整和測定。

瓊脂培養基必須在溶解后進(jìn)行PH的調整，溶解的溫度在45t:以上：因此，固體培養 基應在其使用溫度確定pHt.這時(shí)應使用平頭的復合電極，同吋用手動(dòng)校準PII計的溫度補償。在制備培養基時(shí)，若測定出培養基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時(shí)，說(shuō)明 在調整pH時(shí)產(chǎn)生誤差。

同樣,制備的培養基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌)時(shí)，也可能會(huì )產(chǎn)生PH的變化。對 于脫水培養某，生產(chǎn)廠(chǎng)商己考慮到這一點(diǎn)，通常不謠要再調整其pH但應認真核對待用培養基的pH。如果脫水的瓊脂培養基在再次溶解或制備的過(guò)程中必須調整pH，那么最 好在滅菌操作步驟之后用過(guò)濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調整，以避免造成因再次滅菌而形成的培養基的過(guò)度加熱。當用不同的原料或藥品制備培養基時(shí)，必須在高壓滅菌后檢測培養基的pH。此外，如果發(fā)現培養基的pH在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變 化，可在配制培養基時(shí)對pH進(jìn)行適當調整。但仍需測定培養基滅菌后的最終pH。

上一篇：微生物培養基概述

下一篇：單核李斯特氏菌的典型特征