氫氣培養法概述

將培養物放入罐中。如果使用培養皿,用窄條濾紙夾在培養皿的底和蓋之間以防止冷凝水將其堵住。

除培養物之外，還應加人氧化還原指示劑。指示劑由巰基乙酸培養基組成�；蛘咴趲�塞的試管屮加入含有業(yè)甲基藍的堿性葡萄糖溶液，此溶液由等量的 0.006mol/LNaOH溶液，0.015%的亞甲基藍水溶液和的葡萄糖溶液配制而成。要求 將溶液煮沸至無(wú)色后立即放入厭氧罐中。

將蓋子固定好。如果蓋子和罐之間沒(méi)有配置橡膠或硅橡膠墊圈，則應預先在罐的邊緣涂抹高度真空的硅潤滑脂。

將帶有真空計的抽濾泵連到厭氧罐蓋子上的一個(gè)旋塞上。用帶有壓力計并具有良好調節功能的減壓閥將氫氣供給裝置與罐連接起來(lái)，使氫氣以14kPa或更低的壓力進(jìn)入。 在減壓閥和厭氧罐之間連接一個(gè)緩沖瓶，則可以觀(guān)察氫氣流的情況。另一種加人氫氣的方法是用啟普發(fā)生器。

苜先，打開(kāi)袖濾泵直至罐內壓力達到6.71左右，關(guān)閉旋塞。調節氫氣流量，觀(guān)察緩沖瓶直至大約每秒有一個(gè)氣泡冒出。再將氫氣裝置連接到厭氧罐的第二個(gè)旋塞上，打開(kāi)旋塞，使氫氣慢慢進(jìn)入罐中，罐內壓力達到大氣壓后，再讓氫氣緩緩注入罐中約5關(guān) 閉旋塞，取走氫氣供給裝置和抽真空裝置,將厭氧罐放入所需的溫度下進(jìn)行培養。指示劑 在幾小時(shí)后脫色。培養完畢打開(kāi)罐子前指示劑應保持無(wú)色狀態(tài)。指示劑不脫色可能是由于罐的支路漏氣或者蓋子墊圏、接頭密封不嚴所致，也可能是由于催化劑中毒造成。

培養完畢后,罐中常會(huì )出現輕微的負壓，因此，應先打幵旋塞使罐中達到大氣壓后再關(guān)閉

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