非選擇性培養基

用非選擇性培養基對牛乳、土壤、水和食品等含有混合微生物的樣品進(jìn)行計數時(shí)， 常需要估算平板上生長(cháng)的不同種類(lèi)的微生物的相對數量。然后就可以計算出存在于原始樣品中各種微生物的分布百分比。若不加控制地從培養皿中挑選菌落不能獲得代表 性的菌落,現已有多種方法可獲得真正隨機的菌落。在這些操作中，應該注意到那些可 能會(huì )被完全忽視但卻十分重要的菌體組成.例如，在10⁷的假單胞菌中有10⁷的氣單胞菌，即在平均100個(gè)被檢菌落中僅僅會(huì )發(fā)現一個(gè)氣單胞菌菌落。特定的菌落的選擇 方法取決于所需檢測的菌落數和存在于分離平板上的菌落數目。常用的選擇方法 如下：

方法1

選擇平板上的每一個(gè)菌落。這個(gè)方法獲得的數量與被檢菌落數目大致相等。

方法2

選擇扇形區段和相對扇形區的每一個(gè)菌落。幾種劃分扇區的方法：

1.用油性記號筆在平板的表面劃分扇區(如分四個(gè)區〉。

2.將平板放在哈里遜板上，標記適當的扇區或菌落。哈里遜在研究奶酪中的細菌數和細菌類(lèi)型時(shí)設計了哈里遜板。它能夠很方便地從少量供試的菌落中 獲得有代表性的菌落

將要檢測的培養皿同心地放在板上。首先選擇標記有1的區域中的所有菌落進(jìn)行檢測。如果得不到足夠的數目，選擇標記有“2”的區域的所有菌落。如果有必要可以繼續 選擇“3”、“4”區域中的菌落，直到達到所需的菌落數。一旦開(kāi)始對標記了序號的扇區開(kāi)始計數，必須把這些扇區全部記完。所有在標記線(xiàn)上的菌落可忽略不記。

方法3：復制平板

如果平板表面已接種，可以用復制工具轉移所有的菌落。最簡(jiǎn)單的復制工具是無(wú)菌棉絨墊。它是在一個(gè)直徑比平皿略小的合適的圓柱體(如合金圓柱體)一端的平面上平放一張火菌的棉絨墊(高壓后快速臧少壓力以保 證平絨墊的干燥)而制成。將其輕輕壓在培養基表面，壓住菌落，取出后連續輕輕壓在幾個(gè)準備好的滅菌的適當培養基上，最后壓在對照培養基上檢查轉移是否成功。通常需要 轉移9個(gè)平板加1個(gè)對照。釆用這種方法可以問(wèn)時(shí)檢測每一個(gè)菌落的多種生理特性。如 果要重新使用用過(guò)的平絨布，應將其放到一個(gè)裝水的容器中。高II消毒，清除污染，再經(jīng)洗滌、漂洗、干燥、梳理后迸行高壓滅菌。

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