空腸彎曲桿菌的鑒定

Park和Sanders研制了一種分離受損彎曲桿菌的選擇性培養基。ISO 10272： 1995標準推薦使用這種培養基分離彎曲桿菌。因為ISO現行方法（1997年版）和英國標 準1996修定版所介紹的抗生素混合物的制備方法都不太恰當，目前暫時(shí)仍使用Exeter 培養基分離彎曲桿菌,按照Roberts等人（1995)的操作步驟進(jìn)行操作。Cony等（1995) 對各種不同的增菌、分離培養基的合理性和優(yōu)點(diǎn)進(jìn)行了詳盡的比較。

由于這類(lèi)培養基成分復雜，制備吋很微小的偏差都會(huì )對培養基的性能造成很大的影 響，因此，最好使用商品化的脫水培養基和制備好的抗生素補充液。

平板置于含5%〜10%氧氣、10%二氧化碳和85%〜90%氮氣的微需氧環(huán)境中培養。 將厭氧罐(不加催化劑的)部分排空，再注人氮氣-二氧化碳混合氣體至大氣壓，就能很容 易地得到這種混合的培養環(huán)境。也可用能安裝在厭氧罐(不含催化劑）上的空氣吸收/發(fā) 生袋(如牛津彎曲桿菌袋)或空氣發(fā)生袋(對于不含催化劑的罐)獲得培養環(huán)境(例如牛津彎曲桿菌產(chǎn)氣試劑盒-BR56與3.4L含催化劑的厭氧罐結合使用，或BR60與2.5L含催 化劑的厭氧罐結合使用）。

檢測步驟

從生禽肉等樣品中直接分離

擦拭小雞的皮膚(尤其是肛門(mén)附近的部位）或腹腔,用拭子在Preston血瓊脂平板、 Exeter瓊脂平板或Preston無(wú)血頭孢哌酮瓊脂平板的表面劃線(xiàn)接種。置于微需氧環(huán)境中培養(見(jiàn)前文）血瓊脂或Exeter瓊脂37C培養4h,在42C下培養44〜68h; Pre­ston 無(wú)血頭孢哌酮瓊脂37T：培養48hc

冷凍食品增菌

(1) 將25g食品混人225mLExeter液體培養基中，用均質(zhì)器混勻。轉人到帶螺帽的 容器中(罐或瓶），容器頂部的開(kāi)口要小(有利于保持微需氧環(huán)境），擰緊螺帽，在37℃：培養 18-48h

(2)  轉接選擇性瓊脂培養基(如Preston無(wú)血頭孢哌酮瓊脂，Exeter瓊脂或Preston血 瓊脂)。

驗證

用鏡檢觀(guān)察法進(jìn)行彎曲桿菌的驗證(運動(dòng)、革蘭氏陰性、無(wú)孢子、彎曲的s-型的桿狀 菌）。另外,彎曲桿菌的過(guò)氧化氫酶和氣化酶試驗為陽(yáng)性

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