產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落計數法

用有利于梭狀芽孢桿菌恢復的培養基作為稀釋液，制備待測食品的系列稀釋液。用 無(wú)卵黃胰蛋白胨亞硫酸鐵檸檬酸鹽杯絲氨酸瓊脂Shahidi和Ferguson多黏菌素卡那霉素亞硫酸鹽瓊脂或 新莓素血瓊脂對系列稀釋物進(jìn)行平板計數。對于SICA和 SFA瓊脂,既可采用加人lmL稀釋液后倒平板的方法（lOmL培養基），也可在預先干燥 或倒好的平板上進(jìn)行表面接種。新霉素血瓊脂平板應預先倒好平板，干燥后進(jìn)行表面接種。所有平板在35℃或37℃：厭氧培養24h在MCA和SFA瓊脂上，可疑產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落延黑色的（亞硫酸鹽還原 產(chǎn)生硫化鐵沉淀)。在新霉素血(牛、馬或人血)瓊脂上，產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落產(chǎn)生-圏狹窄的完全溶血帶（形成毒素），在溶血帶外又形成一圏狹窄的非完全溶血帶挑選可疑的產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿搿菌落，穿刺接種至含有0.3%瓊脂的硝酸鹽蛋白 胨水試管，也可以在Willis乳糖卵黃牛乳瓊脂上劃線(xiàn)接 種,預先將幾滴產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿繭的抗毐崠噴灑每個(gè)平板的一半，干燥 后，在整個(gè)平板上劃線(xiàn)接種。還可以將可疑菡落在血瓊脂平板上劃線(xiàn)。
將硝酸鹽瓊脂試管及Willis和fiobbs培養基置37℃厭氧培養24h。血瓊脂平板置 于37℃需氧培養24h培養后，觀(guān)察硝酸鹽瓊脂中菌體的生長(cháng)情況(指菌體運動(dòng)），并測試 硝酸鹽的還原量選取Willis/Hobbs培養基上生長(cháng)的菌株進(jìn)行革蘭氏染色后 鏡檢。產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌為革蘭氏染色陽(yáng)性、不運動(dòng)桿菌,并能還原硝酸鹽。通過(guò)以 下實(shí)驗進(jìn)行驗證:①觀(guān)察WmWHobbs培養基上的菌落——產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌在平 板無(wú)抗毒素的部分，菌落周?chē)�有一圈霧狀帶，在有抗毒素的區域不形成霧狀帶。另外該菌可發(fā)酵乳糖②在血瓊脂需氧培養時(shí)，該菌不生長(cháng)。

上一篇：產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌及多管計數方法

下一篇：空腸彎曲桿菌