細菌能否利用某些含碳化合物作為唯一碳源,反映該菌是否產(chǎn)生代謝這種化合物的有關(guān)酶系,因而作為鑒定依據。測定的基礎培養基配方很多,因種而異,F介紹1種合成的基礎培養基,有些細菌還可適當補加各種維生素。培養基可制成液體,分裝試管,也可制成固體平板?捎糜跍y定的底物種類(lèi)很多,有單糖、雙糖、糖醇、脂肪酸、羥基酸及其他有機酸、醇、各種氨基酸類(lèi)胺類(lèi)以及碳氫化合物等。糖的含量一般為1%,醇類(lèi)酚類(lèi)等的含量一般為0.1-0.2%,氨基酸的含量一般為0.5%。因碳氫化合物不溶于水,可在液體培養基中振蕩培養,或加入到45℃的固體培養基中,振蕩后立即倒成平板。有些底物不宜用高壓滅菌,可用過(guò)濾法滅菌后加入已滅菌的基礎培養基中,某些醇類(lèi)和酚類(lèi)不必滅菌。
接種和觀(guān)察結果:菌種最好做成懸液,避免帶入少量碳源干擾試驗結果。平板培養用接種環(huán)點(diǎn)種,液體培養則用直針接種。每一測定菌必須接種未加碳水化合物的空白基礎培養基作對照。
適溫培養2、5、7天后觀(guān)察,凡測定菌在有碳水化合物的培養基中生長(cháng)情況,明顯超過(guò)空白培養基的生長(cháng)量為陽(yáng)性,否則為陰性。假若兩種培養基上生長(cháng)情況差別不明顯,開(kāi)在同一培養基上連續移種3次,如差別仍不明顯則以陰性論。
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