李氏桿菌屬的檢測程序

---⑴ 增菌 
 目前常用的單核增生李斯特氏菌檢測增菌肉湯主要有半量Fraser肉湯、 Fraser肉湯（FB）、UVM（Modified University of Vermont broth，也叫UVM1）、LEB（Listeria enrichment broth）和BLEB（buffered Listeria enrichment broth）  
半量Fraser肉湯和Fraser肉湯 • 具有選擇性和區別性。 • 加入檸檬酸鐵銨和七葉苷，起到區別的作用。李斯特氏菌可以水解七葉苷，與培養基中的鐵離子反應，使培養基變黑，可直觀(guān)的從培養液的顏色就可以判斷是否有單核李斯特氏菌的生長(cháng)。 
• 氯化鋰、吖啶黃和萘啶酮酸作為選擇性因子。 
• 半量Fraser肉湯與Fraser肉湯所用的添加劑一樣 

• 
半量Fraser肉湯：萘啶酮酸10mg/L，吖啶黃12.5mg/L；Fraser肉湯：萘啶酮酸20mg/L，吖啶黃的25mg/L  UVM 
• UVM只有選擇性沒(méi)有區別性 
• 加入萘啶酮酸和鹽酸吖啶黃，作為選擇性因子。雖然其中含有七葉苷，但是沒(méi)有添加檸檬酸鐵銨，不能發(fā)生黑色的顏色反應。 LEB和BLEB 
• 只有選擇性沒(méi)有區別性 
• LEB是在TSB-YE的基礎上加入鹽酸吖啶黃、萘啶酮酸和放線(xiàn)菌酮等選擇性因子；加入的丙酮酸鈉，有助于受損細胞的恢復；不含七葉苷和檸檬酸鐵銨，無(wú)顏色反應。 
• BLEB是在LEB基礎上加入緩沖體系：磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉 檢測程序---⑵分離 
• 分離培養基有：OXA、PALCOM、LPM、MOX等，但首選仍然是OXA。分離原理主要是基于李斯特氏菌具有β－D－葡萄糖苷酶的活性，能水解培養基中的七葉苷，產(chǎn)生七葉素，與鐵離子產(chǎn)生顏色反應而，使菌落為棕褐色，并帶有褐色暈圈，而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能發(fā)生這種反應 • 還有一些選擇性顯色培養基，如BCM、ALOA、CHROMagar listeria、Rapid’L. mono等，其原理主要是檢測由毒力基因編碼的溶血素，而此種溶血素只存在于單核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中，因而可以很好的將此兩種菌同李斯特屬的其他種分開(kāi)。 檢測程序---⑶鑒定 
藍色菌落檢驗（Henry illumination） 典型運動(dòng)：相差顯微鏡，輕微旋轉或翻跟頭 動(dòng)力試驗：7天，傘形生長(cháng) 過(guò)氧化氫酶試驗：陽(yáng)性 革蘭氏染色：陽(yáng)性短桿菌 溶血試驗：穿刺接種血平板 硝酸鹽還原試驗：5天，陰性 
糖發(fā)酵試驗：葡萄糖、麥芽糖和七葉苷，李斯特菌屬反應均為陽(yáng)性，除格氏李斯特甘露醇陰性，李斯特其他種甘露醇陰性，木糖和鼠李糖最有檢測意義。 目前單核細胞增生李斯特菌檢驗多采用國標法(GB/T4789.30)。 

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