霉菌的鑒定步驟
錄入時(shí)間:2013-11-8 10:00:42
來(lái)源:海博生物
1、分離、純化菌種: 應用分離培養基和純種移植法,在相應的培養基上培養出單純菌株。
2、培養特性的觀(guān)察:按照培養時(shí)間、生長(cháng)速度、菌落質(zhì)地、顏色、形態(tài)、氣味、培養基表面變化、孢子及菌絲的顏色、結構、大小進(jìn)行觀(guān)察并記錄。 3、顯微特征的觀(guān)察 (1)制片鏡檢:
在潔凈的載玻片上加一滴乳酸-苯酚液,用經(jīng)過(guò)火焰滅菌的接種鉤從菌落的邊緣挑取少許幼嫩的菌體,置于乳酸-苯酚溶液中,然后加蓋玻片,注意不要產(chǎn)生氣泡,此為臨時(shí)性的載片標本;若需保存較長(cháng)時(shí)間,可在蓋玻片周?chē)眉幽么髽?shù)膠封牢,貼上標簽,做成半永久性標本。 (2)活體觀(guān)察
活體觀(guān)察有小培養、大培養和霉變糧粒的顯微觀(guān)察3種方法。
①小培養(載玻片培養):在無(wú)菌條件下,滴一滴無(wú)菌的培養基于干凈的載玻片上,接種后蓋上蓋玻片,放人已滅菌的培養皿中,用滅菌的濕棉球或紗布保持濕度,蓋好皿蓋置培養箱中進(jìn)行培養,可以隨時(shí)用顯微鏡觀(guān)察其生長(cháng)和發(fā)育情況。
②大培養(培養皿培養):即將培養有霉菌菌落的培養皿除去皿蓋置于顯微鏡的載物臺上,用低倍鏡觀(guān)察霉菌的生長(cháng)情況,可以看到其營(yíng)養菌絲、子實(shí)體及孢子等。
觀(guān)察時(shí)必須注意:勿讓鏡頭接觸霉菌而污染;觀(guān)察人員不能面對標本,防止孢子飛散吸人體內,影響健康;觀(guān)察完畢立即加蓋,防止污染標本。 ③霉變糧粒觀(guān)察:取發(fā)霉的糧食顆粒,放在載玻片上,然后用低倍鏡觀(guān)察發(fā)霉糧粒上的霉菌生長(cháng)狀態(tài)和個(gè)體形態(tài)。
④進(jìn)行活體觀(guān)察時(shí),如果倒置顯微鏡就更方便、更便于觀(guān)察;如果遇到比較好的菌種標準或視野,也可以用照相機拍下來(lái),苡便長(cháng)期保存。
4、查對資料、鑒定菌種:根據培養特征、顯微特征觀(guān)察和記錄的結果,查對菌屬檢索表和有關(guān)的技術(shù)資料,依據菌種的培養性狀和個(gè)體形態(tài),即可鑒定出霉菌的屬、群、系或種。
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