(1)涂片:取一塊干凈的載玻片,并在其中央滴一小滴生理鹽水(或無(wú)菌蒸餾水)。接種環(huán)在酒精燈上殺菌后從斜面挑取少量菌種(金黃色葡萄球菌或枯草桿菌)與玻片上的水滴混勻后,涂布成一均勻的薄層。涂布面一般以直徑1cm大小范圍為宜。 (2)干燥與固定:涂片最好在室溫下使其自然干燥。亦可在酒精燈上微微加熱,加速水分蒸發(fā),但切勿過(guò)熱。固定時(shí),在酒精燈火焰外層盡快地來(lái)回通過(guò)2~3次,多為2~3s,以載玻片背面不覺(jué)燙手為宜,放置待冷后,進(jìn)行染色。
(3)染色:在涂片上滴染色液一滴,使染色液覆蓋涂片,染色約1min。
(4)水洗:斜置載玻片,在來(lái)自水龍頭下用小股水線(xiàn)沖洗,直至洗下的水呈無(wú)色為止。
(5)干燥:用吸水紙吸去涂片邊緣的水珠,置室溫下自然干燥或微微加熱,以加快干燥速度。注意用吸水紙時(shí)切勿將菌體擦掉。
(6)鏡檢:用顯微鏡觀(guān)察,并用鉛筆繪出細菌形態(tài)圖。
2. 革蘭氏染色法:革蘭氏染色反應是細菌分類(lèi)和鑒定的重要性狀。
革蘭氏染色是一種復染色法(由兩種或多種染料染色的方法,稱(chēng)復染色法,又叫鑒別染色法)。
革蘭氏染色法(Gram stain)不僅能觀(guān)察到細菌的形態(tài)而且還可將所有細菌區分為兩大類(lèi):染色反應呈藍紫色的稱(chēng)為革蘭氏陽(yáng)性細菌,用G+表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱(chēng)為革蘭氏陰性細菌,用G¯表示。
革蘭氏染色需要的試劑主要有草酸銨結晶紫染液、碘液、石炭酸復紅染液、95%乙醇、番紅染液、香柏油、二甲苯。 • 染色流程:制片→干燥→固定→初染→水洗→媒染→水洗→脫色→水洗→復染→水洗→干燥→觀(guān)察
上一篇:單細胞細菌染色
下一篇:濕墨水法