單細胞細菌染色

1.涂片：(1)在潔凈無(wú)油脂的載玻片上滴一滴生理鹽水(如果是液體菌懸液,則可不滴)。(2)用滅菌接種環(huán)挑取菌落少許至載玻片的生理鹽水內,并輕輕涂布成薄薄的菌膜。若是菌液標本,則用無(wú)菌接種針直接涂布成菌膜。 2.干燥：涂布的標本,一般在室溫下自然干燥。 
•  若需加速干燥，則可在酒精燈火焰上方利用其熱空氣加溫,切忌火烤和溫度過(guò)高。 

3.固定：細菌固定常用的是火焰加熱法 
•  將干燥涂片迅速通過(guò)火焰2~3次,溫度不宜過(guò)高,以玻片背面觸及皮膚有熱感而不燙手為度。 
4.染色：染色的目的是增大標本與環(huán)境的反差，便于在顯微鏡下觀(guān)察。 
• 以普通涂片標本的染色為例,就是將所需染色液滴加在標本上，以覆蓋涂膜為夠，達到所需染色時(shí)間，傾去染色液，水洗，吸干即可。 
5.媒染：有的染色還需要增加媒染劑。以增大染料與被檢標本物質(zhì)的親和力，或使染料更好地固定于被染標本。 
• 媒染劑可用于細菌標本固定之后，也可包含在固定劑或染色液中，革蘭氏染色中的碘液就是媒染劑。 
6.脫色：使著(zhù)色的染料脫去顏色稱(chēng)為脫色。能脫色的物質(zhì)稱(chēng)為脫色劑。 
• 在染色中,使用脫色劑的作用有的是起溶媒作用,有的是影響細菌蛋白質(zhì)的電離度，改變電荷的性質(zhì)和數量，因而影響染料的染色質(zhì)量。 
• 利用脫色劑主要是檢查染料與細菌結合的穩定程度，作為鑒定染色之用。如革蘭氏染色使用乙醇，就是鑒別不同的細菌。 
• 使用脫色劑時(shí)，就是將脫色劑滴在經(jīng)過(guò)染色的標本上，作用一定時(shí)間后，傾去脫色劑，水洗即成。有的脫色一定要掌握好時(shí)間，否則不能達到理想目的。 
7.復染：在進(jìn)行鑒別染色時(shí),已經(jīng)進(jìn)行過(guò)脫色的標本，常需要復染劑重復染色1次，使復染劑與初染顏色形成鮮明對比。復染不宜太強，以免覆蓋初染顏色。

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