卵磷脂酶試驗

1、原理：某些微生物能產(chǎn)生卵磷脂酶，在鈣離子存在時(shí)，能迅速分解卵磷脂，生成不溶性甘油酯和水溶性磷酸膽堿，在卵黃瓊脂平板上菌落周?chē)�形成不透明的乳濁環(huán)或混濁白環(huán)，或使血清、卵黃液變混濁，以此鑒別細菌。 2、試驗方法： （1）卵黃平板法  A法：將待檢菌培養物劃線(xiàn)接種或點(diǎn)種于卵黃瓊脂平板上，36±1 ℃培養3～ 6h，觀(guān)察結果。 B 法： 
先用卵黃磷脂酶抗血清將平板涂一半，置于36 ℃待干后，將待檢菌接種于未涂抗血清的一半卵黃瓊脂平板上，再轉劃已涂過(guò)抗血清的一半，36±1 ℃厭氧培養24～ 48h，觀(guān)察結果。 
在未涂抗血清的一半平板上，菌落周?chē)�形成較大的不透明乳白色混濁區，在涂抗血清的一半平板上，菌落周?chē)鸁o(wú)不透明混濁區，為陽(yáng)性。 兩邊均無(wú)不透明區，為陰性。 
乳糖卵黃瓊脂平板,借以確定該菌可否產(chǎn)生卵磷脂酶。 卵磷脂酶具抗原性，其活性可被相應抗血清所抑制， （2）卵黃鹽水法： 
 將庖肉培養基培養物經(jīng)除菌過(guò)濾，收集濾液。在兩支滅菌試管內，每管加入1%卵黃鹽水0.4mL,在一管中加入濾液0.2mL，另一管加入生理鹽水0.2mL作對照。在36 ℃ 水浴中，經(jīng)2h、 4h、 8h、 24h觀(guān)察結果。  管底發(fā)生混濁沉淀，對照管無(wú)沉淀者，為陽(yáng)性。 3、結果觀(guān)察與記錄： 
 菌落周?chē)�形成較大的不透明區，為陽(yáng)性。  兩邊均無(wú)不透明區，為陰性。 
 管底發(fā)生混濁沉淀，對照管無(wú)沉淀者，為陽(yáng)性。  兩管無(wú)沉淀者，為陰性。

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