用涂抹棒，海綿或者其他采樣設備收集環(huán)境樣本。
將收集的樣本添加10毫升滅菌的緩沖蛋白胨水，將樣本與緩沖蛋白胨混合1分鐘，將樣品置于室溫（20-30℃）1小時(shí)，最久不超過(guò)1.5小時(shí)，以修復損傷的李斯特菌。
將測試片放在平坦處，掀起上層膜。
用移液器垂直滴加3毫升樣品到下層膜中央，將上層膜緩慢蓋下，以免產(chǎn)生氣泡。
輕輕將塑料壓板放在位于接種區上層膜上，不要壓，扭轉或者滑動(dòng)壓板。提起壓板等至少十分鐘，以使膠體凝固。
將測試片透明面朝上，可疊放至十片，在37℃±1℃培養26-30小時(shí)，可以用標準菌落記數器或者其他光學(xué)放大器判讀，不要記數圓形輪廓上的菌落，因為他們不受選擇性培養基的影響。
對于定性檢測，根據紫紅色菌落是否存在，結果記為檢出或者未檢出。
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