流式細胞術(shù)
錄入時(shí)間:2013-9-22 9:18:07
來(lái)源：海博生物
流式細胞術(shù)（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ， ＦＣＭ）是采用流式細胞儀對單個(gè)細胞或其他生物微粒進(jìn)行快速定性、定量分析與分選的一門(mén)技術(shù)。ＦＣＭ可通過(guò)熒光染料標記可檢測病原菌、毒素和血清抗體，還可在細胞懸液中原位雜交產(chǎn)生熒光檢出被病毒感染細胞內的特異性病毒核酸（ＤＮＡ或ＲＮＡ）。流式細胞儀主要由細胞流動(dòng)室（包括樣品管、鞘液管）、激光聚焦區、檢測系統、數據處理系統等４部分組成，其工作原理是將被檢測對象制備成一定濃度的細胞（微粒）懸液，經(jīng)熒光染色后放入流式細胞儀的樣品管中，細胞在氣體的壓力下進(jìn)入鞘液管，在鞘液的約束下，細胞（微粒）排列成單列從流動(dòng)室的噴嘴高速?lài)姵龀蔀榧毎ㄎ⒘＃┮毫�，�?jīng)熒光染色后的細胞經(jīng)過(guò)激光聚焦區時(shí)受激光激發(fā)，產(chǎn)生散射光和熒光信號，通過(guò)一些波長(cháng)選擇通透性濾光片，可以將不同波長(cháng)的散射光和熒光信號區分而將單個(gè)細胞（微粒）液滴分離，并由計算機進(jìn)行圖象及數據處理�，F在該技術(shù)已經(jīng)能夠檢測純化的ＤＮＡ可達ｐｇ級水平，在１０ｍｉｎ內可以完成數據的收集和分析。Ｃｏｈｅｎ等［３４］用熒光染料ＥＢ和光散射信號在２ｈ內分別在４３個(gè)不同來(lái)源的臨床標本中檢測出細菌。Ｔａｐｐ等［３５］使用類(lèi)似方法對蘇云金桿菌產(chǎn)生的毒素進(jìn)行檢驗和示蹤，結果顯示ＦＣＭ比斑點(diǎn)ＥＬＩＳＡ法更敏感、快速。
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