小腸結腸炎耶爾森菌:
一、細菌的傳播與致病
小腸結腸炎耶爾森菌廣泛分布于自然界,是能在冷藏溫度下生長(cháng)的少數幾種腸道致病菌之一。本菌天然寄居在多種動(dòng)物體內,如豬、鼠、家畜等,通過(guò)污染食物(牛奶、豬肉等)和水經(jīng)糞—口途徑感染或因接觸染疫動(dòng)物而感染。它除引起胃腸道癥狀外,還能引起呼吸系統、心血管系統、骨骼結締組織等疾患,甚至可引起敗血癥,造成死亡。該菌還是重要的食源性致病菌,很多國家都已將該菌列為進(jìn)出口食品的常規檢測項目。
本病多發(fā)生于冬春季節,可散發(fā)或暴發(fā)流行,多累及嬰兒及兒童。不同年齡患者的癥狀有所不同,5歲以下患兒以腹瀉為多見(jiàn),臨床表現與菌痢不能區別。本病為自限性的輕型急性胃腸炎,一般表現為腹瀉、發(fā)熱和腹痛,糞便呈黃色水樣或含粘液,帶血或血便者較少見(jiàn),腹瀉每日3~10次,可持續1~2周,個(gè)別可長(cháng)達3個(gè)月。偶可引起腸道潰瘍、穿孔和腹膜炎。慢性腹瀉常持續數月,甚至可擬似慢性特發(fā)性炎性腸病。發(fā)熱從短期高熱到持續幾周的低熱不等,亦為本病的突出癥狀。5歲以上兒童和青少年常有下腹痛,末梢血白細胞總數增加,癥狀極似闌尾炎。在成人中,腸炎后1~2周,有的可出現結節性紅斑,常見(jiàn)的并發(fā)癥為活動(dòng)性關(guān)節炎。此外,尚有腦膜炎及敗血癥等臨床類(lèi)型。
但國內既往對該菌重視不夠,醫務(wù)人員普遍缺乏對本菌的認識,臨床醫生在對胃腸道疾病診斷時(shí)很少考慮小腸結腸炎耶爾森菌感染,檢驗人員也很少能為準確診斷提供依據。由于診斷不及時(shí),容易造成誤診,多數小腸結腸炎耶爾森菌感染病人很難得到及時(shí)、針對性治療,造成感染慢性化和并發(fā)各種合并癥,有些小腸結腸炎耶爾森菌感染甚至被當作闌尾炎施行手術(shù)。
二、細菌的生物學(xué)特性
小腸結腸炎耶爾森菌腸桿菌科耶爾森菌屬,為革蘭氏陰性小桿菌,有毒菌株多呈球桿狀,無(wú)毒株以桿狀多見(jiàn)。對營(yíng)養要求不高,能在麥康凱瓊脂上生長(cháng),但較其他腸道桿菌生長(cháng)緩慢,培養的最適宜溫度為28℃,最適pH值為7~8,初次培養菌落為光滑型,通過(guò)傳代接種后菌落可能呈粗糙型。
本菌具有“嗜冷性”,在水中和低溫下(4℃)能生長(cháng),為腸道中能在4℃生長(cháng)繁殖的少數細菌之一。因此,食品冷藏保存時(shí),應防止被該菌污染。
野生動(dòng)物、家畜(豬、狗和貓)、牡蠣和水源中都能分離到本菌,亦可從健康人或患者糞便中分離得到,其傳播方式可能與攝入被尿、糞便污染的食物(尤其是肉類(lèi))和接觸感染動(dòng)物等有關(guān)。
本菌可產(chǎn)生耐熱腸毒素,121℃30分鐘不被破壞,對酸堿穩定,pH1~11不失活。腸毒素產(chǎn)生迅速,在25℃下培養12小時(shí),培養基上清液中即有腸毒素產(chǎn)生,24~48小時(shí)達高峰。腸毒素是引起腹瀉的主要因素。毒力型菌株均有VW抗原(蛋白脂蛋白復合物),為毒力的重要因子,與侵襲力有關(guān),侵襲力可能是耶爾森菌感染腸道表現的病理基礎。
三、細菌的實(shí)驗室檢查及其它檢查
1.標本采集常為糞便以及食物,也可取血液和尿液等。
糞便標本采集要求:采集的動(dòng)物糞便標本應新鮮,病人的糞便標本最好在發(fā)病3~5病日內,使用抗生素之前。糞便采集量每份不少于5克,置于干凈塑料袋或置于運送培養基中于6小時(shí)內送實(shí)驗室檢測,夏季標本的保存和運送要注意冷藏。原則上每天采集的標本可分兩次送至實(shí)驗室,即上午的標本中午12時(shí)前送到,下午的標本晚6時(shí)前送到,以便于及時(shí)開(kāi)展檢測。
2.分離培養——以糞便標本為例
(1)冷增菌糞便與改良磷酸鹽緩沖液以1:10混合于4℃增菌,并于10天,20天分別轉種麥康凱MAC平板或耶爾森菌屬專(zhuān)用選擇性培養基CIN于25℃培養24~48h.
(2)該菌的菌落在MAC平板上呈無(wú)色透明,在CIN平板上呈粉紅色,偶爾有一圈膽鹽沉淀;
(3)將可疑菌落接種改良克氏雙糖培養基25℃培養24h~48h,上、下層均為陽(yáng)性(即顯黃色)者接種Rustigian氏尿素培養基(使成濃厚菌懸液),振蕩10秒鐘25℃培養2~4h.
(4)尿素陽(yáng)性者再接種半固體各2管,1管于25℃培養24h,另1管于37℃培養24h.該菌在25℃動(dòng)力陰性,37℃動(dòng)力陰性。
3.生化鑒定(25℃培養):典型小腸結腸炎耶爾森菌主要的生化反應情況:脲酶陽(yáng)性、硫化氫陰性、VP25℃陽(yáng)性、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陽(yáng)性。發(fā)酵葡萄糖、蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不發(fā)酵密二糖和鼠李糖。
4.血清分型
四、細菌的防治
癥狀較輕時(shí),本病多為自限性,無(wú)需抗菌治療。宜進(jìn)行適當隔離,糞便及排泄
物要消毒,以免疾病傳播。有失水者及時(shí)補液,以糾正水、電解質(zhì)、酸堿紊亂。對病程較長(cháng),有并發(fā)癥或呈暴發(fā)型者,應給予抗菌治療。本菌對所有氨基糖甙抗生素、
多粘菌素、復方新諾明、四環(huán)素、呋喃唑酮和喹諾酮類(lèi)等均敏感。
五、細菌的生物安全防護
根據《病原微生物生物實(shí)驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)規定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)小腸結腸炎耶爾森菌屬于三類(lèi),BSL~2.相關(guān)的防護事宜包括:
(1)操作要求
1、實(shí)驗時(shí),未經(jīng)實(shí)驗室主任同意,限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗室。
2、不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。
3、所有的操作過(guò)程應盡量細心,避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。
4、對于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。
5、注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進(jìn)行人工處理,要不將之小心放入不會(huì )被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉移至處理區消毒,最好高壓殺菌。
6、打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷
7、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前,均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內,密封運出實(shí)驗室。離開(kāi)該系統進(jìn)行消毒的物料,在轉移前應包裝,其包裝應符合有關(guān)的法規。
8、濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向實(shí)驗室主任報告。進(jìn)行適當的醫學(xué)評估、觀(guān)察、治療,保留書(shū)面記錄。
9、按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實(shí)驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。污染的設備在送去修理、維護前,要按照相關(guān)的規定消毒;在離開(kāi)設施轉移前,要按照相關(guān)的規定打包運輸。
(2)安全設備
1、正確使用和保養生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。
2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實(shí)驗過(guò)程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。
3、涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機,若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi),則可在開(kāi)放實(shí)驗室內離心。
4、當必須在生物安全柜外處理標本時(shí),需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。
5、在實(shí)驗室內,必須使用專(zhuān)用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實(shí)驗室區域時(shí),防護服必須留在實(shí)驗室內。防護服可以在實(shí)驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。
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