除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質(zhì)與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動(dòng)物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁，要采取專(zhuān)門(mén)的細胞破碎方法。
1.機械破碎
（1）研磨
研磨是將剪碎的動(dòng)物組織置于研缽或勻漿器中，加入少量石英砂研磨或勻漿，即可將動(dòng)物細胞破碎，這種方法比較溫和，適宜實(shí)驗室使用。工業(yè)生產(chǎn)中可用電磨研磨。細菌和植物組織細胞的破碎也可用此法。
（2）勻漿
勻漿這是一種較劇烈的破碎細胞的方法，通�？上扔眉矣檬称芳庸C將組織打碎，然后再用10000r/min-20000r/min 的內刀式組織搗碎機（即高速分散器）將組織的細胞打碎，為了防止發(fā)熱和升溫過(guò)高，通常是轉10秒-20秒，停10秒-20秒，可反復多次。
（3）膠體磨
膠體磨的基本原理是流體或半流體物料在離心力的作用下，強制通過(guò)高速相對運動(dòng)的定齒與動(dòng)齒之間，使物料受到強大的剪切力，磨擦力、高頻振動(dòng)和高速旋渦等復雜力等作用，有效地被粉碎、乳化、均質(zhì)、混合，從而達到精細超微的效果。定轉子間的高速相對運動(dòng)是使膠體磨工作獲得物理微細度的主要條件，只有提高磨盤(pán)的精密度與線(xiàn)速度，才能達到良好的加工效果。
2. 物理破碎
（1）壓榨
壓榨是一種溫和的、徹底破碎細胞的方法。在1000×105Pa-2000×105Pa 的高壓下使幾十毫升的細胞懸液通過(guò)一個(gè)小孔突然釋放至常壓，細胞將徹底破碎。這是一種較理想的破碎細胞的方法，但儀器費用較高。
（2）冷熱交替
冷熱交替是在90℃左右維持數分鐘，立即放入冰浴中使之冷卻，如此反復多次，絕大部分細胞可以被破碎，細菌或病毒中提取蛋白質(zhì)和核酸時(shí)可用此技術(shù)。
（3）反復凍融
反復凍融是將待破碎的細胞冷至15℃-20℃，然后放于室溫（或40℃）迅速融化，如此反復凍融多次，由于細胞內形成冰粒使剩余胞液的鹽濃度增高而引起細胞破碎。
（4）超聲波
超聲波是借助超聲波的振動(dòng)力破碎細胞壁和細胞器。破碎微生物細菌和酵母菌時(shí)，時(shí)間要長(cháng)一些，處理的效果與樣品濃度和使用頻率有關(guān)。使用時(shí)注意降溫，防止過(guò)熱。
3.化學(xué)與生物化學(xué)破碎
（1）有機溶劑
有機溶劑是利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶劑或SDS（十二烷基硫酸鈉）等表面活性劑處理細胞，
可將細胞膜溶解，從而使細胞破裂，此技術(shù)也可以與研磨法聯(lián)合使用。
（2）自溶
自溶是將新鮮的生物材料存放于一定的pH 和適當的溫度下，細胞結構在自身所具有的各種水解酶（如蛋白酶和酯酶等）的作用下發(fā)生溶解，使細胞內含物釋放出來(lái)，此法稱(chēng)為自溶法。該法使用時(shí)要特別小心操作，因為水解酶不僅可以使細胞壁和膜破壞，同時(shí)也有可能會(huì )把某些要提取的有效成分分解。
（3）溶脹
溶脹是在低滲溶液和低濃度的稀鹽溶液中，由于存在滲透壓差，溶劑分子大量進(jìn)入細胞，將細胞膜脹破釋放出細胞內含物。
（4）酶解
酶解是利用各種水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶和酯酶等，于37℃，pH8，處理15分鐘，可以專(zhuān)一性地將細胞壁分解，釋放出細胞內含物，酶解破碎適用于多種微生物。例如從某些細菌細胞提取質(zhì)粒DNA 時(shí)，可采用溶菌酶（來(lái)自蛋清）破細胞壁，而在破酵母細胞時(shí)，常采用蝸牛酶（來(lái)自蝸牛），將酵母細胞懸于0.1mmol/L 檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液（pH=5.4）中，加1%蝸牛酶，在30℃處理30分鐘，即可使大部分細胞壁破裂，如同時(shí)加入0.2%疏基乙醇效果會(huì )更好。此法可以與研磨聯(lián)合使用
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