培養基的配制原則

  
（一）培養基組分應適合微生物的營(yíng)養特點(diǎn)
即根據不同微生物的營(yíng)養需要配制不同的培養基。 
         不同營(yíng)養類(lèi)型的微生物，其對營(yíng)養物的需求差異很大。如自養型微生物的培養基完全可以（或應該）由簡(jiǎn)單的無(wú)機物質(zhì)組成。異養做生物的培養基至少需要含有一種有機物質(zhì)，但有機物的種類(lèi)需適應所培養菌的特點(diǎn)。 
       按微生物的主要類(lèi)群來(lái)說(shuō)，它們所需要的培養基成分也不同： 
                        細菌：      牛肉膏蛋白胨培養基 
                                          LB  (Luria-Bertani) 
                        放線(xiàn)菌：   高氏一號培養基 
                        真菌：      查氏合成培養基 
                                          PDA (Potato-Dextrose-Agar) 
                            酵母菌；   麥芽汁 
當對試驗菌營(yíng)養需求特點(diǎn)不清楚的時(shí)候，可以采用‘生長(cháng)譜’法進(jìn)行測定。 
（二）營(yíng)養物的濃度與比例應恰當
●濃度過(guò)高——微生物的生長(cháng)起抑制作用， 
  濃度過(guò)小——不能滿(mǎn)足微生物生長(cháng)的需要。 
●碳氮比（C/N）直接影響微生物生長(cháng)與繁殖及代謝物的形成與積累，故常作為考察培養基組成時(shí)的一個(gè)重要指標； 
C/N比值= 碳源中的碳原子的mol數/氮源中所含的氮原子的mol數 
例：谷氨酸生產(chǎn)中 
 C/N ＝4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少； 
C/N＝3/1 時(shí)，菌體生長(cháng)受抑制，而谷氨酸大量增加。 
●速效性氮（或碳）源與遲效性氮（或碳）源的比例 
 ●各種金屬離子間的比例 
（三）物理化學(xué)條件適宜
（1）pH:      各類(lèi)微生物的最適生長(cháng)pH值各不相同： 
                     細    菌：7.0~8.0    放線(xiàn)菌：7.5~8.5 
        酵母菌：3.8~6.0    霉    菌：4.0~5.8 
        在微生物的生長(cháng)和代謝過(guò)程中，由于營(yíng)養物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累，培養基的初始pH值會(huì )發(fā)生改變，為了維持培養基pH值的相對恒定，通常采用下列兩種方式： 
內源調節：在培養基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽；調節培養基的碳氮比。 
外源調節：按實(shí)際需要不斷向發(fā)酵液流加酸或堿液 
☆磷酸緩沖液：pH值從6.0~7.6之間 
☆加入CaCO3： 
☆培養基中所含氨基酸、肽、蛋白質(zhì)等物質(zhì)也可起到緩沖作用。 
（2）滲透壓和aw
滲透壓     
        等滲溶液    適宜微生物生長(cháng) 
        高滲溶液    細胞發(fā)生質(zhì)壁分離 
        低滲溶液    細胞吸水膨脹，直至破裂 
大多數微生物適合在等滲的環(huán)境下生長(cháng)，而有的菌如Staphylococcus aureus則能在3mol/L  NaCl的高滲溶液中生長(cháng)。能在高鹽環(huán)境（2.8~6.2/L  NaCl）生長(cháng)的微生物常被稱(chēng)為嗜鹽微生物（Halophiles）。 
（3）氧化還原電勢(redox poyential)
各種微生物對培養基的氧化還原電勢的要求： 
好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在>0.1V以上的環(huán)境中均能生長(cháng)).厭氧微生物：只能在+0.1V以下生長(cháng) 
兼性厭氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下發(fā)酵 

培養基是多氧化還原偶的復雜電化學(xué)系統，測出的Eh值僅代表其綜合結果。 
對微生物影響最大的是：分子氧和分子氫的濃度 
培養基中常用的還原劑：巰基乙酸、抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等。 

 

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