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    鑒定感染細菌種屬的方法



    錄入時(shí)間:2012-4-11 16:31:21 來(lái)源:醫學(xué)教育網(wǎng)

        1.細菌種屬的鑒定

      DNA堿基組成的測定 G+C mol%含量不同的細菌,為不同種細菌;含量相同的可能為不同種的細菌。細菌的G+C mol%相當穩定,不受培養條件、菌齡和其他外界因素影響。最常用的方法是熱變性法。

      DNA-DNA雜交 DNA雜交可得出DNA之間核苷酸順序的互補程度,從而推斷不同細菌基因組間的同源性。

      16S rRNA同源性分析 rRNA-DNA雜交、16S rRNA序列測定、16S-23S rRNA序列測定

      此外限制性?xún)惹忻搁L(cháng)度多態(tài)性分析(RFLP)、脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)、隨機引物擴增法(RAPD)等技術(shù)常用于菌株間的差異比較。

      2.細菌種屬特異基因

      某些基因為細菌種特有或屬共有,通過(guò)對這些基因的檢測可以鑒定細菌的種或屬。如編碼吸附和侵襲上皮細胞表面蛋白的inv基因:invA、invB、invC、invD、invE等是一組只存在于致病性沙門(mén)菌中的獨特的保守基因序列。鞭毛蛋白dlh基因通常只存在于傷寒沙門(mén)菌;IS6110、IS986插入片段為結核分枝桿菌復合群所擁有等。

      3.細菌毒力基因

      可以測定霍亂弧菌的霍亂毒素基因、產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌的耐熱(ST)和不耐熱腸毒素(LT)以及白喉棒狀桿菌的外毒素基因以示相應的細菌存在。

     

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