細菌的生化試驗

　　細菌的生化試驗是將已分離純化的待檢細菌，接種到一系列含有特殊物質(zhì)和指示劑的鑒別培養基中，觀(guān)察該菌在這些培養基內的pH變化，或是否產(chǎn)生某種特殊的代謝產(chǎn)物，現代細菌學(xué)已普遍采用微量、快速、自動(dòng)化等鑒定系統，已有很多相應的配套試劑供種屬鑒定使用，常見(jiàn)的生化試驗有：

　　1.糖（醇、苷）類(lèi)發(fā)酵試驗：各種細菌分解糖（醇、苷）的能力不同，分解后代謝產(chǎn)物不同，可根據其分解產(chǎn)物鑒別細菌。實(shí)際應用中，可選擇合適的含有單糖、雙糖、三糖或多糖的培養基，接種待檢菌，經(jīng)培養后觀(guān)察結果。若能分解糖類(lèi)產(chǎn)酸，培養基中的指示劑呈酸性反應；產(chǎn)氣的細菌則出現氣泡或裂隙。如大腸桿菌能分解乳糖，傷寒桿菌與痢疾桿菌則不能，用此可加以區別。糖發(fā)酵試驗是鑒定細菌最常用的生化反應，特別用于腸桿菌科細菌的鑒定。

　　2.甲基紅試驗：細菌分解葡萄糖形成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步分解成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸，使培養基pH下降至4.4以下，加入甲基紅指示劑變?yōu)榧t色。若產(chǎn)酸量少或將酸進(jìn)一步分解為醇、酮、醛等，使培養基pH在5.4以上，甲基紅試驗則呈橘黃色。該試驗簡(jiǎn)稱(chēng)為MR試驗。將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養基內，培養后滴加甲基紅試劑，呈紅色為MR試驗陽(yáng)性，橘紅色為弱陽(yáng)性，橘黃色為陰性。該試驗主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別，前者陽(yáng)性，后者陰性。

　　3.VP試驗：有些細菌能使丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，進(jìn)而在堿性溶液中被空氣中的氧氧化成雙乙酰，雙乙酰在α-萘酚和肌酸的催化下，生成紅色化合物，為VP試驗陽(yáng)性。將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養基，培養后按每毫升培養基加入含0.3%肌酸或肌酐的0.1ml40%KOH溶液，48～50℃水浴2h或37℃4h，充分搖動(dòng)后觀(guān)察結果，紅色為VP試驗陽(yáng)性。

　　4.吲哚試驗：有些細菌含有色氨酸酶，分解培養基中的色氨酸產(chǎn)生吲哚，吲哚與對二甲基氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈紅色。該試驗也稱(chēng)靛基質(zhì)試驗。將待檢菌接種于蛋白胨水培養基中，培養后沿管壁加入對二甲基氨基苯甲醛試劑0.5ml，使其形成兩層液面，兩液面接觸處呈紅色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性。該試驗主要用于腸道桿菌的鑒定。

　　5.硫化氫試驗：有些細菌分解含硫氨基酸生成硫化氫，遇培養基中的醋酸鉛或硫酸亞鐵可形成黑色的硫化鉛或硫化亞鐵沉淀。將待檢菌接種于醋酸鉛培養基中培養，有黑色沉淀者為陽(yáng)性，無(wú)變化者為陰性。H2S試驗常用于腸桿菌科菌屬間的鑒定。

上一篇：檢測念球菌屬的甘露聚糖及其抗原

下一篇：細菌對糖和蛋白質(zhì)的分解