蘋(píng)果的莖尖培養

蘋(píng)果的莖尖培養

（一）從健壯母株上，選取帶芽或莖尖的莖段，先用70～75％的酒精浸30～60s，再用10％的次氯酸鈉溶液浸泡10～15 min，或用0．1％升汞液浸5～7 min，最后用無(wú)菌水洗3～5次。

（二）剝取莖尖材料接種。為了培養無(wú)病毒苗，取的莖尖材料應小，一般為0．1～0．2㎜。為了加速無(wú)病毒材料的繁殖，或切取較大的莖尖，約0．3～0．5㎜大小，甚至帶芽的較大莖段，如1～3㎜。莖尖的大小同培養的難易有關(guān)，大的分化率高，分化速度快。所以除了特殊的目的外，寧肯用較大的莖尖。

（三）把莖尖接種在MS或LS＋2mg∕LBA＋300～500mg∕L CH或LH＋3％蔗糖的培養基上，誘導芽的分化。在25～30℃和光照下，先培養7～10d，見(jiàn)莖尖膨大轉綠，再培養在黑暗中，可加快分化和綠化苗的生長(cháng)。一般在暗培養中增殖2～3代。隨后要轉入光照下，以使苗生長(cháng)健壯。光強以1500～2000Lx為宜。

（四）把伸長(cháng)的芽接種到MS＋0．5～1mg∕L? BA＋300 mg∕L CH或改良的MS＋4．4umolBA＋0．5～49umolGA3的培養基上，這時(shí)苗會(huì )長(cháng)大并產(chǎn)生叢生苗。每4～8周可分別繁殖一次，每個(gè)月約可增殖5～10倍。

（五）切取2㎝以上的帶頂芽的苗切段，插入1∕2MS或其它低鹽培養基（如White和Nitsh）中，附加1mg∕LIAA、0．2mg∕LIBA和3mg∕LGA3，可有效地促進(jìn)生根。

    對生根困難的蘋(píng)果砧木M9的試管苗生根，以先接種在含有2 mg∕L IBA、162 mg∕L 根皮酚的LS培養基上，培養4～7d后，轉入無(wú)激素的LS培養基，生根快而頻率高。

（六）蘋(píng)果的試管苗也可以不進(jìn)行生根，而直接嫁接到蘋(píng)果矮化砧木上，既可保持樹(shù)體有良好的矮化特性，又可通過(guò)采用無(wú)病毒繁殖材料妥善地解決無(wú)病毒繁殖問(wèn)題。

（七）生根苗移出進(jìn)行砂培2～3周，最后在土壤中培養，其成活率可達26．7～56．9％。

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