蘋(píng)果的花粉培養

蘋(píng)果的花粉培養

（一）選取小孢子處于單核期的花蕾枝條。小孢子單核期的花芽外部形態(tài)特征是：花芽已充分開(kāi)放，有4～5片葉完全展開(kāi)，中心花蕾吐紅，周?chē)�花蕾明顯增大，但花序尚未分離。

（二）把花蕾插入水中，放在1～3℃的冰箱上預處理。

（三）摘取花蕾，在70％的酒精浸約半分鐘，再在10％漂白粉上清液中浸15～20min，無(wú)菌水沖洗3～5次。

（四）胚狀體的誘導。從花蕾中取出花藥，接種到MS＋0．4mg∕L2，4－D＋0．2 mg∕L KIN＋4 mg∕L IAA＋3～8％蔗糖的固體培養基上培養，每瓶30～50個(gè)花藥。在25～30℃下培養70d后，由變褐的花藥裂口處開(kāi)始產(chǎn)生胚狀體。

（五）無(wú)根苗的誘導�！“旬a(chǎn)生胚狀體的花藥接種到MS＋0．5 mg∕L IBA＋0．1 mg∕L GA3＋1 mg∕L BA＋3～5％蔗糖的固體培養基上培養，在25～30℃和光照10h下，約經(jīng)40～100d以上，胚狀體可形成次生胚狀體或叢生芽，進(jìn)而發(fā)育成無(wú)根苗。

（六）根系的誘導。切取無(wú)根苗，轉接到1∕2MS＋1．5 mg∕L IAA＋15～2％蔗糖的固體培養基上培養。約經(jīng)15～20d，小苗莖基部長(cháng)出根，形成完整植株。也可用50～100 mg∕L IBA溶液浸泡苗梢基部15～30 min，再插入無(wú)生長(cháng)素的培養基上，也能較順利地誘導生根。

（七）花粉植株的移栽。在春、秋季盆栽，保持15～20℃和高空氣濕度，一般可使成活率達到40％以上。

（八）對有些不易生根和提早開(kāi)花的植株，可用嫁接法進(jìn)行繁殖。

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